一、大鼠退变颈椎间盘组织基因表达谱的研究（论文文献综述）
胡海权[1]（2021）在《MicroRNA-143-5p调控AMPK通路在颈椎间盘退行性变中的作用及机制研究》文中进行了进一步梳理第一部分椎间盘退行性变的病理改变和miRNA基因表达筛查目得:通过miRNAs基因芯片测序筛选及探索颈椎间盘退变组与正常组的软骨终板组织差异表达的miRNAs。方法:纳入21例需手术治疗的颈椎间盘退行性变患者为退变组,13例无颈椎间盘退行性变患者为正常组,采用基因芯片进行测序,退变组与正常组颈椎间盘软骨终板组织通过总RNA提取,分别进行RNA质量评估,c DNA文库建立,测序质量评估,miRNAs基因表达量变化和差异表达谱分析;应用miRNAs测序来筛选差异表达的miRNAs和应用GO功能分析和KEGG通路分析对预测的miRNAs靶基因进行详细分析。通过qRT-PCR验证5个符合候选标准的miRNAs变化。结果:总RNA提取和RNA质量分析均显示测序结果符合质量要求。通过miRNAs基因芯片测序筛选退变组与正常组间存在的差异表达的miRNAs;总共筛查出35条miRNA表达存在显着差异,22条上调,13条下调。采用GO和KEGG富集分析显示退变组差异表达的miRNAs靶基因主要参与DNA-模板化、转录调控等生物过程,参与AMPK、MAPK、Wnt、Hippo等信号通路。总共hsa-miR-143-5p,hsa-miR-222-5p,hsa-miR-140-5p-F,hsa-miR-199a-5p和hsa-miR-132在正常组和退变组中表达存在显着差异。通过qRT-PCR验证显示,退变组的hsa-miR-143-5p具有显着差异,hsa-miR-222-5p,hsa-miR-140-5p-F,hsa-miR-199a-5p和hsa-miR-132在正常组与退变组间无显着差异。结论:通过基因芯片测序筛选和qRT-PCR验证显示miR-143-5p在颈椎间盘退行性变中显着上调。miR-143-5p在椎间盘退行性变可作为一个新的治疗靶点。第二部分miRNA-143-5p通过AMPK介导颈椎间盘退行性变目得:探索miRNA-143-5p是否通过AMPK介导颈椎间盘退行性变及可能调控机制;方法:纳入21例需手术治疗的颈椎间盘退行性变患者,13例无颈椎间盘退行性变患者为正常组,13例为外伤所致需颈椎手术,切除椎间盘软骨组织。应用HE法探索退变组和正常组椎间盘软骨终板病理变化;运用western Blotting和免疫组织探索p-AMPK,AMPK,EEF2在退行性变软骨终板中的蛋白表达的变化。结果:与正常组相比,退行性变组病理结构紊乱改变明显;生物信息学显示e EF-2是理论上的靶基因。WB显示退行性变组p-AMPK显着增加,EEF-2显着降低,AMPK变化不限制。结论:miR-143-5p在颈椎间盘退行性变中显着上调,其机制可能与AMPK通路相关。miR-143-5p在椎间盘退行性变可作为一个新的治疗靶点。
樊晓明[2]（2020）在《基于NF-B信号通路探索针刀对椎间盘退变的影响及临床研究》文中进行了进一步梳理目的:本课题通过临床和实验研究,观察针刀松解“颈周腧穴”对颈型颈椎病患者的临床疗效和对大鼠颈椎间盘组织的形态学及NF-κB信号通路的影响,探讨针刀干预治疗颈型颈椎病的机制。方法:（1）将符合纳入标准的患者分成治疗组和对照组,采用JOA、VAS评分、颈椎生理曲度评估临床疗效。（2）将SD大鼠分为空白组、假手术组、模型组、针刀组,采用HE染色和Western blot分别观察其形态学变化及相关因子IL-1β、MMP-3、NF-κBp65的表达。成果:（1）两组VAS评分较治疗前降低,JOA评分较治疗前提高,治疗组较对照组颈椎生理曲度明显改善。（2）针刀组大鼠颈椎间盘退变程度低于模型组;不同周龄大鼠颈椎间盘退变程度不同提示可缩短造模周期。针刀组IL-1β的表达较模型组、假手术组有明显差别,NF-κBp65的表达与模型组相比明显较少,MMP-3的表达在模型组与空白组之间。结论:（1）针刀松解“颈周腧穴”治疗颈型颈椎病有较好的效果,且可操作性好,规避了医疗风险。（2）针刀干预降低了颈椎间盘退变引发的NF-KB表达升高。
熊洋[3]（2020）在《ACDR术后随访观察及三七总皂苷调节TGF- β/Smads通路对异位骨化的影响》文中研究表明1 研究目的1.1临床研究:观察颈椎病行Hybrid手术（人工颈椎间盘置换术（Artificial cervical disc replacement,ACDR）联合颈椎前路减压椎间融合术（Anterior cervical discectomy and fusion,ACDF））或单纯ACDF手术治疗患者中期临床疗效及异位骨化发生情况,探讨颈椎前路术后异位骨化成因及其对临床结果的影响。1.2临床基础研究:分析颈椎成骨性退变的可能机制,探索TGF-β/Smads信号通路在颈椎成骨性退变中的作用。1.3基础实验研究:基于TGF-β/Smads信号通路,初步探索三七总皂苷靶向防治异位骨化的有效性及作用机制。2 研究方法2.1 临床研究:采用回顾性队列研究,通过电话、门诊回访近年连续双节段病变,于我科行Hybrid手术或ACDF手术治疗的颈椎病患者,查阅并收集其临床及影像学资料,比较各组患者术后中期临床疗效及影像学结果,观察术后异位骨化情况并探讨其成因及对临床的影响。2.2 临床基础研究:采用病例对照方法,将重度颈椎退变拟行手术治疗患者按照术前影像学是否具有成骨性退变分为成骨组与非成骨组两组,分别收集各组手术节段颈椎间盘等病变组织样本,行不同组织学染色比较两组退变间盘组织学差异,运用免疫组化及半定量方法检测并比较两组样本中TGF-β 1、p-Smad2及p-Smad3表达的差异,探索TGF-β/Smads信号通路对颈椎成骨性退变的作用。2.3 基础实验研究:进行前瞻性随机对照实验,建立大鼠跟腱横断异位骨化模型,分别给予不同浓度三七总皂苷干预。术后行X线检查,从影像学观察各组异位骨化发生情况;行跟腱形态学检测,观察各组大鼠跟腱愈合情况,比较各组跟腱体积大小;行组织学染色,比较各组跟腱组织学差异;最后运用免疫组织化学方法比较各组跟腱组织中TGF-β/Smads相关信号因子表达差异。3 研究结果3.1临床研究:（1）一般资料:本研究中共纳入83名患者,最终59名患者获得有效随访,有效随访率约71%,其中男27例,女32例,年龄34-78岁,平均56.67岁,平均随访时间约6 年（79.69±16.89 个月）。（2）临床疗效及影像学评估:末次随访时,Hybrid组与ACDF组颈部及上肢疼痛VAS评分、JOA评分、NDI评分较术前均有明显改善,差异具有统计学意义（P<0.05）;但在术前及末次随访时,两组间比较未见明显统计学差异（P>0.05）。末次随访时,Hybrid组Byran间盘置换节段活动度（7.19±3.83）与术前（6.48±3.28）比较有所增加,但差异不具有统计学意义（P>0.05）;两组患者手术节段曲度较术前均有显着增加（P<0.05）;两组C2-7整体活动度较术前显着减少（P<0.05）,组间比较ACDF组（25.06±12.99）显着小于 Hybrid 组（34.15±14.43,P<0.05）;在 ACDF 组,上位相邻节段活动度（13.57±5.37）较术前（10.19±4.41）增加,差异具有统计学意义（P<0.05）;末次随访时,与Hybrid组（10.41±5.01）相比较亦显着增加（P<0.05）。（3）异位骨化发生情况:末次随访时,Hybrid组共5例Byran间盘置换节段出现重度异位骨化,包括4例Ⅲ级及1例Ⅳ级异位骨化,总体发生率约15.6%。3.2 临床基础研究:（1）一般资料:本研究经筛选最终纳入患者22名,其中男14名,女8名,平均年龄55.12岁,行单节段、双节段及三节段手术患者分别为3名、15名及4名,共45例手术节段,其中成骨组为25例,非成骨组为20例。（2）组织学检测结果:在成骨组椎间盘外层纤维环、内层纤维环及髓核中细胞数均多于非成骨组,差异具有统计学意义（P<0.05）。在内层纤维环及髓核中,成骨组番红0着色平均光密度（Average optical density,AOD）显着低于非成骨组（P<0.05）。免疫组织化学检测示TGF-β 1及其下游p-Smad2和p-Smad3在两组椎间盘各部分及成骨组骨赘中均有表达。在成骨组外层纤维环及髓核中,TGF-β 1表达AOD均高于非成骨组,差异具有统计学意义（P<0.05）;对于p-Smad2,在成骨组内层纤维环组织中显着高于非成骨组（P<0.05）;对于p-Smad3,在成骨组外层纤维环中p-Smad3表达AOD显着高于非成骨组（P<0.05）。3.3基础实验研究:（1）术后X线检查结果:手术组包括高剂量组（HP组）、中剂量组（MP组）、低剂量组（LP组）及西药组（X组）、模型组（M组）在术后5w成骨率分别为67%、67%、50%、50%及67%;在术后10w,HP组成骨率为83%,其余手术组成骨率均为100%。各组间成骨累计光密度（Integral optical density,IOD）比较,术后5w,M组高于其他手术组,差异具有统计学意义（P<0.05）;术后10w,实验组MP组IOD显着高于其他手术组（P<0.05）。（2）术后跟腱形态学检测结果:术后2w,各手术组大鼠横断跟腱均已愈合。2w至10w手术组跟腱硬度逐渐增加,各组大鼠跟腱体积均有不同程度增长。在术后2w,实验组跟腱体积均显着高于M组、假手术组（J组）及正常组（Z组）（P<0.05）;实验组中LP组显着高于HP组及X组,差异具有统计学意义（P<0.05）;术后5w,实验组及X组体积均高于M组、J组及Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）;LP组及X组跟腱体积显着大于MP组,差异具有统计学意义（P<0.05）;术后10w,手术组跟腱体积均大于Z组（P<0.05）,且LP组及M组大于HP组和MP组,差异具有统计学意义（P<0.05）。（3）普通组织学染色结果:手术组跟腱组织中细胞数量明显增多,跟腱纤维相对更为纤细,排列相对紊乱。在术后5w,各手术组均可见部分跟腱中形成骨组织及其周围软骨内化骨区;术后10w,各手术组骨化灶均更为成熟。（4）免疫组织化学检测结果:TGF-β 1及其下游p-Smad2、p-Smad3在各组大鼠跟腱中均有不同程度表达,各蛋白表达IOD组间比较在术后各时间点均具有显着统计学差异（P<0.001）。在术后2w,HP组及LP组TGF-β 1表达IOD显着大于J组（P<0.05）;对于p-Smad2,HP组IOD大于Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）;LP组及M组大于Z组及J组,差异具有统计学意义（P<0.05）;手术组p-Smad3表达IOD均高于J组及Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）;MP组高于LP组、X组及M组,差异具有统计学意义（P<0.05）;LP组IOD高于X组,差异具有统计学意义（P<0.05）。术后5w,MP组TGF-β 1表达IOD高于J组、Z组及X组,差异具有统计学意义（P<0.05）;LP组及M组TGF-β1高于J组,差异具有统计学意义（P<0.05）;对于p-Smad2,HP组、MP组、X组及M组IOD均高于J组及Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）;HP组和M组IOD高于MP组和LP组,差异具有统计学意义（P<0.05）;X组IOD亦高于LP组,差异具有统计学意义（P<0.05）。对于p-Smad3,MP组、LP组及M组IOD均高于J组及Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）。在术后10w,对于TGF-β 1,M组高于J组及Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）;HP组及LP组IOD均高于J组及Z组,但仅与J组差异具有统计学意义（P<0.05）,与Z组差异不具有统计学意义（P>0.05）。对于p-Smad2,MP组及LP组IOD高于J组,差异具有统计学意义（P<0.05）;X组IOD高于J组及Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）。对于p-Smad3,HP组IOD高于Z组,差异具有统计学意义（P<0.05）。4 研究结论（1）颈椎前路Hybrid手术治疗双节段重度颈椎病可获得满意的中期临床疗效,相比于ACDF,其中期影像学结果更具优势。（2）颈椎术后重度异位骨化发生率低,它可明显限制人工颈椎间盘置换节段活动度,可能存在再次压迫脊髓及神经根的潜在风险,但其对中期临床疗效未见显着影响,其长期影响仍需要进一步随访研究。（3）TGF-β/Smads信号通路参与到了颈椎间盘的退变及异位骨的形成中,但下游p-Smad2与p-Smad3对间盘成骨性退变的作用可能存在差异。（4）三七总皂苷对TGF-β/Smads信号通路或具有双向调节作用,其抑制作用可能存在一个窗口阈值。（5）一定条件下,三七总皂苷具有降低异位骨化发生率并降低异位骨骨质的潜能,但也存在加重异位骨化的风险。
刁志君[4]（2019）在《益气活血方促进破裂型腰椎间盘突出髓核重吸收的机制研究》文中进行了进一步梳理[目的]1、探索破裂型腰椎间盘突出髓核基因表达谱并筛选其差异表达基因;2、探索益气活血方介导差异表达基因CCL5促进破裂型腰椎间盘突出髓核重吸收的机制。[方法]1、收集患者破裂及非破裂型腰椎间盘突出髓核组织,利用基因芯片技术,初步筛选破裂型髓核差异表达基因,并进行生物信息学分析;2、通过体外实验,培养人髓核细胞,观察破裂及非破裂型髓核细胞形态区别,利用实时q PCR和Western Blotting技术检测差异表达基因CCL5及TNF-α、IL-1β在各组髓核细胞中的表达;3、益气活血方干预后,再次检测CCL5及TNF-α、IL-1β在各组髓核细胞中的表达;4、收集数据,统计分析。[结果]1、芯片结果显示,差异表达2倍以上且统计分析P<0.05的基因75条,其中56条基因表达上调,19条基因表达下调;上调基因中,THSD7A差异表达最明显,上调18倍;差异表达基因CCL5显着上调;GO分析表明多种生物学功能与差异表达基因有关,主要包括细胞迁移、细胞基质粘附、多细胞生物体内稳态等;KEGG通路分析显示差异表达显着的基因参与的信号通路主要包括ECM-受体相互作用、血管加压素调节的水重吸收、趋化因子信号通路、氨基酸合成与代谢等信号通路。2、细胞学形态观察:镜下可见,非破裂腰椎间盘突出髓核细胞多呈多角形,散在分布,破裂型细胞则呈聚合趋势,多为长梭形,与非破裂型腰椎间盘突出髓核细胞比较,破裂型腰椎间盘突出髓核显示出明显的形态变性。3、基因表达:CCL5、TNF-α、IL-1β在破裂型髓核中的表达明显高于非破裂型（P<0.05）;在破裂型含药组髓核细胞中的表达显着高于无药组（P<0.05）。[结论]1、破裂型腰椎间盘突出髓核基因表达发生了明显的变化,THSD7A可作为破裂型腰椎间盘突出髓核的特征性差异表达基因,CCL5等基因在破裂型腰椎间盘突出髓核中差异表达明显;2、益气活血方可能通过介导CCL5的表达促进TNF-α、IL-1β等促炎因子高表达,并共同参与炎症反应,破坏细胞外基质稳态,加速降解以促进重吸收现象。
陈舰舰[5]（2013）在《基于“肝主筋”组方通过TNF-α/NF-κB通路干预颈椎间盘退变》文中提出颈椎间盘退变是引起椎间盘疾病的重要原因。椎间盘是由两种主要的结构组成：髓核和纤维环。椎间盘退变的一个重要信号是髓核组织中蛋白聚糖类的丢失。椎间盘内水份丢失导致其承受压力的减弱,引起椎间盘病变,导致一系列临床症状和体征,包括椎间盘高度降低,T2加权磁共振成像信号强度减少等,同时也改变了脊柱本身的力学变化。目前,没有很好阻断或延缓椎间盘退变的方法。因此,深入研究椎间盘退变发生的机制,并运用中医药手段防治具有重要意义。由于目前缺少合适的大型动物的颈椎间盘退变的模型,本实验通过全内窥镜下损伤山羊颈椎间盘纤维环来建立CDD的模型,通过影像学、组织学、分子生物学来比较中药组和其他分组对颈椎间盘损伤后的产生的病理变化。目的（1）通过全内窥镜微创技术建立颈椎间盘退变的动物模型,观察术前、术后、中药干预后山羊颈椎间盘损伤后的组织形态学改变、病理变化及影像学特点。（2）探索TNF-α与NF-κB信号转导途径在颈椎间盘退变中发生发展中的相互作用,进一步阐明椎间盘源性疼痛的发病机制,为该病提供新的治疗靶点。（3）探讨中医“肝主筋”理论与NF-κB信号转导通路的关系,促进中医病因病机理论现代化。方法选择6个月大的波杂山羊18只,分成3组,正常假手术组（A组）、模型空白组（B组）、模型活血舒筋方治疗组（C组）。B、C组采用损伤纤维环方法制作颈椎间盘退变模型,全麻下,取颈部右前外侧,在全内窥镜操作系统下,逐个暴露C3/4、C4/5椎间盘,在靠近上方椎体的下软骨终板左前外侧纤维环1/3处用榔头敲入2.5mm的克氏针1cm。A组暴露方法与B、C组一致,但不损伤纤维环。手术后1周,C组动物灌服“活血舒筋方”提取物（剂量按体表面积换算）,A组、B组动物不给药,但灌服等量生理盐水。给药2个月后,在全麻下进行颈椎间盘磁共振T1和T2加权成像、不同回声时间T2加权成像、以及扩散（张量）成像,并处死动物。磁共振成像比较各组损伤节段椎间盘退变情况与相邻的正常椎间盘差别。动物处死后,立即截取颈椎标本,迅速放入液氮中冷冻,-80℃保存待检查。将各组羊C3/4、C4/5椎间盘组织进行组织学和组织免疫化学检查,观察椎间盘退变过程中活血舒筋方提取液等对椎间盘终板软骨与髓核组织形态学、TNF-α NF-κB表达、金属蛋白酶、凋亡相关蛋白（Bcl-2）的影响。结果（1）术后2个月山羊MRI检查发现手术部位颈椎间盘发生退变。（2）肉眼观察模型空白组（B组）、模型活血舒筋方治疗组（C组）的椎间盘高度丢失。（3）组织学和核磁共振显示正常假手术组（A组）、模型空白组（B组）、模型活血舒筋方治疗组（C组）的C2/3、C3/4、C4/5、C5/6椎间盘在实验期间未发现后部纤维环内损伤。（4）术后2个月,通过核磁共振分析发现,模型空白组（B组）、模型活血舒筋方治疗组（C组）的C3/4、C4/5椎间盘出现退变,且模型空白组（B组）的C3/4、C4/5退变程度模型活血舒筋方治疗组（C组）C3/4、C4/5重,T2像上出现信号强度降低。（5）对正常假手术组（A组）、模型空白组（B组）、模型活血舒筋方治疗组（C组）的组织进行病理学观察,活血舒筋方组较模型空白组的髓核细胞饱满,退变较轻,活血舒筋方组能延缓其髓核细胞的退变。（6） Tunel染色示模型空白组（B组）、模型活血舒筋方组（C组）髓核凋亡细胞数明显高于正常假手术组（A组）（P<0.05）。通过中药对其进行干预,模型活血舒筋方组（C组）颈椎间盘髓核内凋亡细胞数明显下降,较模型空白组（B组）少（P<0.05）。（7）术后2个月正常假手术组（A组）、模型空白组（B组）、模型活血舒筋方治疗组（C组）进行聚合酶链式反应,髓核组织TNF-α、HIF-1、NF-κB、Bcl-2、MMP-1中各组基因之间表达情况存在一定的差异（P<0.05）。结论（1）经克氏针损伤山羊颈椎间盘外侧纤维环后,早期发生颈椎间盘退变。（2）经全内窥镜系统损伤山羊颈椎间盘外侧纤维环,可以制备出颈椎间盘退变的动物模型。（3） TNF-α/NF-κB信号转导通路在颈椎间盘退变中发生发展中可能起重要作用。（4） TNF-α能够激活NF-κB通路,“肝主筋”组方活血舒筋方通过TNF-α/NF-κB信号转导途径能相对改善椎间盘营养环境,能有效缓解颈椎间盘退变。（5）活血舒筋方能相对延缓颈椎间盘内髓核细胞的凋亡。
陆军,王遵来,李岩[6]（2012）在《颈椎病中医药治疗的实验研究》文中提出颈椎病是因颈椎间盘变性、颈椎骨质增生所引起的,以颈肩痛,放射到头枕部或上肢,重者出现双下肢痉挛,行走困难,以致于四肢瘫痪为主要表现的综合征。颈椎病归属于中医"项强"、"眩晕"、"骨痹""、血痹"的范围。该病的治疗包括了手术治疗和非手术治疗两种方法,其中中医的针灸、推拿、中药
邢秋娟,王拥军,施杞,金国琴[7]（2011）在《益气化瘀补肾法延缓椎间盘衰老的机理探讨》文中提出衰老是生物界的普遍规律,无血供组织的椎间盘同样存在衰老。随着人口日益老龄化,使人们对传统中医认识椎间盘衰老的病因病机、延缓衰老的临床疗效探讨更加重视。肾虚是椎间盘衰老的根本,气虚血瘀加速椎间盘衰老的进程。益气化瘀补肾法延缓椎间盘衰老的机制可能是通过调控椎间盘细胞衰老和椎间盘退变相关基因、蛋白,调控椎间盘组织细胞的内环境,平衡和调节细胞外基质网络的合成与降解,维护椎间盘正常的细胞生物活性和营养代谢,达到延缓椎间盘衰老的目的。
张小卫,郭团茂,刘淼,张银刚[8]（2011）在《人颈椎间盘退变基因表达谱的研究》文中提出目的探讨人的颈椎间盘组织基因表达谱的变化,分析椎间盘退变的发生机制。方法改进的一步法抽取6例退变和6例正常颈椎间盘髓核的总RNA,用Cy3、Cy5荧光标记制成cDNA探针,再与22 575个cDNA基因表达芯片杂交,激光扫描荧光信号,对差异基因表达谱进行分析。结果进行6次扫描,退变和正常椎间盘髓核组织共有570个基因发生了差异表达,其中上调550个,下调20个。结论多种基因表达异常与颈椎间盘退变相关。
陈祁青,赵继荣,李红专[9]（2011）在《中药干预椎间盘退变的实验研究概况》文中研究指明椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IVDD）是一系列脊柱退行性疾病的根本病理基础,但目前椎间盘退变的机制仍不十分清楚。祖国医学对椎间盘退变的防治具有较深刻的认识。近年来,国内学者从不同角度对中药干预椎间盘退变的机理进行了深入的实验研究,取得相当的进展,现综述如下。
卞琴,赵东峰,施杞,梁倩倩,卢盛,赵永见,王拥军[10]（2010）在《调和气血法在骨退行性病变中的应用》文中研究表明
二、大鼠退变颈椎间盘组织基因表达谱的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大鼠退变颈椎间盘组织基因表达谱的研究（论文提纲范文）
（1）MicroRNA-143-5p调控AMPK通路在颈椎间盘退行性变中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词语 |
| 引言 |
| 第一部分 椎间盘退行性变的病理改变及miRNA基因表达筛查 |
| 1.前言 |
| 2.材料和方法 |
| 2.1 实验主要试剂 |
| 2.2 实验主要仪器和设备 |
| 2.3 组织样本 |
| 2.4 实验方法 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 椎间盘退行性与正常组患者的椎间盘组织的病理结果 |
| 3.2 miRNA测序质量评估结果 |
| 3.3 miRNA数据分析结果 |
| 4.讨论 |
| 第二部分 miRNA-143-5p通过AMPK介导颈椎间盘退行性变 |
| 1.前言 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 病理检查: |
| 2.2 免疫组化 |
| 2.3 蛋白免疫印迹(Western Blot) |
| 3.实验结果 |
| 3.1 退变组较正常组的p-AMPK蛋白值显着增加,总AMPK两组蛋白表达变化不变 |
| 3.2 WB法显示AMPK下游EEF2 值显着降低 |
| 3.3 免疫组化法显示AMPK下游EEF2 值显着降低 |
| 4.讨论 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 微小RNA(microRNA)在椎间盘退变的作用及机制研究进展 |
| 参考文献 |
（2）基于NF-B信号通路探索针刀对椎间盘退变的影响及临床研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 引言 |
| 临床研究 |
| 1 研究资料 |
| 1.1 病例来源 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 终止和剔除标准 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 病例分组 |
| 2.2 治疗器械及药物 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 注意事项 |
| 3 观察指标 |
| 3.1 主症分级 |
| 3.2 疗效评价 |
| 4 统计方法 |
| 5 研究结果 |
| 5.1 一般资料比较 |
| 5.2 各时间点的VAS评分 |
| 5.3 各时间点的JOA评分 |
| 5.4 颈椎生理曲度评定 |
| 5.5 疗效评定 |
| 6 讨论 |
| 6.1 传统医学对颈椎病的认识 |
| 6.2 现代医学对颈椎病的认识 |
| 6.3 针刀医学对颈椎病的认识 |
| 6.4 选穴依据 |
| 6.5 结果分析 |
| 7 结论 |
| 实验研究 |
| 1 理论依据 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 大鼠颈椎间盘的HE染色切片 |
| 2.4 Western blot检测相关指标 |
| 3 统计方法 |
| 4 结果 |
| 4.1 HE染色观察各组椎间盘形态学变化 |
| 4.2 Western blot检测结果 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 7 不足与展望 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 颈型颈椎病的针刀治疗与实验研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 发表论文 |
（3）ACDR术后随访观察及三七总皂苷调节TGF- β/Smads通路对异位骨化的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 异位骨化发病机制研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 诱发刺激因素 |
| 3 细胞来源 |
| 4 成骨环境 |
| 5 异位骨化与免疫反应 |
| 6 基于TGF-β/Smads信号通路异位骨的形成 |
| 参考文献 |
| 综述二 异位骨化的中西医防治研究进展 |
| 1 异位骨化的微观靶向防治 |
| 2 异位骨化的临床防治 |
| 3 中医对异位骨化的认识 |
| 4 三七总皂苷基于TGF-β/Smads信号通路的临床应用 |
| 5 对三七总皂苷防治异位骨化的展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 临床与基础研究 |
| 研究一 颈椎前路双节段Hybrid手术中期疗效随访及异位骨化评价 |
| 1 临床资料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 研究二 TGF-β/Smads相关因子在颈椎成骨性退变中的作用初探 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 研究三 三七总皂苷基于TGF- β /Smads信号通路对大鼠跟腱横断异位骨化的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录 颈椎前路术后随访病例报告表 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
（4）益气活血方促进破裂型腰椎间盘突出髓核重吸收的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 引言 |
| 第一部分 筛选破裂型腰椎间盘突出髓核差异表达基因 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要仪器和试剂 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 标本收集 |
| 2.2 髓核组织总RNA抽提 |
| 2.3 RNA质检 |
| 2.4 总RNA的纯化 |
| 2.5 荧光标记 |
| 2.6 标记产物纯化 |
| 2.7 芯片杂交 |
| 2.8 芯片洗涤和扫描 |
| 2.9 生物信息学分析 |
| 2.10 芯片结果验证 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 差异表达基因 |
| 3.2 GO、KEGG富集分析 |
| 3.3 芯片验证 |
| 4 结论 |
| 5 讨论 |
| 第二部分 益气活血方介导CCL5促进破裂型腰椎间盘突出后重吸收的机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 主要仪器和试剂 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 取材 |
| 2.2 含药血清制备 |
| 2.3 髓核细胞分组培养 |
| 2.4 Real Time PCR法检测目的基因 |
| 2.5 Western Blotting检测CCL5、TNF-α、IL-1β蛋白的表达 |
| 2.6 统计方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 组织形态学观察 |
| 3.2 Real-Time qPCR检测细胞中CCL5、TNF-α、IL-1βmRNA的表达 |
| 3.3 Western Blotting检测CCL5、TNF-α、IL-1β蛋白表达 |
| 4 结论 |
| 5 讨论 |
| 全文研究总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录1 发表综述 多配体蛋白聚糖-4在椎间盘退变中的作用 |
| 参考文献 |
| 附录2 在读期间参加过科研课题、发表论文、专着编写和参加会议情况 |
（5）基于“肝主筋”组方通过TNF-α/NF-κB通路干预颈椎间盘退变（论文提纲范文）
| 目录 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写一览表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1. 椎间盘退变的现代机制研究 |
| 1.1 细胞凋亡 |
| 1.2 营养 |
| 1.3 生物力学 |
| 1.4 细胞因子 |
| 1.5 基因影响 |
| 2. 现代对椎间盘退变的研究 |
| 2.1 细胞疗法 |
| 2.2 生物活性因素 |
| 2.3 基因疗法 |
| 3. 祖国医学对颈椎病的认识及治疗 |
| 3.1 “痹证”的涵义 |
| 3.2 “痹证”的病因病机 |
| 3.3 “痹证”的中医治疗 |
| 第二部分 山羊颈椎间盘退变模型的建立 |
| 1. 实验动物与材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 活血舒筋方 |
| 1.3 中药汤剂的制备 |
| 2. 仪器设备与实验药品 |
| 2.1 仪器设备 |
| 2.2 实验药品 |
| 3. 实验方法 |
| 3.1 动物模型制作 |
| 3.2 术后处理 |
| 3.3 组织制备 |
| 3.4 山羊颈椎MRI检查 |
| 3.5 统计方法 |
| 4. 结果 |
| 4.1 一般情况 |
| 4.2 MRI检查 |
| 4.3 组织学检查 |
| 4.4 Tune1染色 |
| 5. 讨论 |
| 5.1 全内窥镜微创手术对颈椎间盘的影响 |
| 5.2 颈椎间盘退变模型的建立 |
| 5.3 实验的注意要点 |
| 5.4 邻近椎间盘退变的影像学表现 |
| 5.5 颈椎间盘退变的组织学观察 |
| 5.6 颈椎间盘髓核细胞Tune1染色 |
| 第三部分 山羊颈椎间盘髓核组织中TNF-α、NF-κB、Bcl-2等相关基因表达研究 |
| 1. 仪器和试剂 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 RNA的提取 |
| 2.2 引物设计 |
| 2.3 RNA浓度和纯度的测定 |
| 2.4 RNA质量测定 |
| 2.5 反转录PCR(20μL体系) |
| 2.6 qPCR |
| 3. 结果 |
| 3.1 RNA的抽提 |
| 3.2 引物设计 |
| 3.3 Quantitative real time PCR结果 |
| 3.4 各组基因的实验结果及统计学分析 |
| 3.5 Bcl-2基因表达量与髓核细胞凋亡数的相关性分析 |
| 4. 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 |
| 致谢 |
（6）颈椎病中医药治疗的实验研究（论文提纲范文）
| 1 对椎间盘组织形态学的影响 |
| 2 对椎间盘细胞凋亡的作用 |
| 3 对椎间盘蛋白多糖的影响 |
| 4 对椎间盘基因表达谱的研究 |
| 5 对软骨终板营养及软骨细胞的作用 |
| 6 对颈椎影像学及生物力学的影响 |
| 7 对血液流变学及血流动力学的影响 |
| 8 对炎性介质及细胞因子的作用 |
| 9 对细胞外基质的作用 |
| 10 对其他方面的研究 |
| 10.1 止痛作用 |
| 10.2 信号传导 |
| 10.3 抗自由基损伤 |
| 11 总结 |
（7）益气化瘀补肾法延缓椎间盘衰老的机理探讨（论文提纲范文）
| 1 肾虚是椎间盘衰老的根本, 气虚血瘀加速椎间盘衰老 |
| 2 益气化瘀补肾法通过调控椎间盘细胞及细胞外基质网络的基因、蛋白影响椎间盘的形态、结构、营养及功能 |
| 3 小结与展望 |
（8）人颈椎间盘退变基因表达谱的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 组织标本 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 总RNA抽提 |
| 1.4 表达谱探针制备和杂交 |
| 1.5 荧光扫描和结果分析 |
| 2 结 果 |
| 2.1 基因芯片表达谱的图像扫描结果 |
| 2.2 结果散点图分析结果 |
| 2.3 表达基因的筛选结果 |
| 3 讨 论 |
（9）中药干预椎间盘退变的实验研究概况（论文提纲范文）
| 1 对椎间盘超微结构的影响 |
| 2 对细胞外基质的影响 |
| 3 对炎性介质的影响 |
| 4 对细胞因子的影响 |
| 5 对细胞凋亡的影响 |
| 6 对椎间盘体外培养细胞的影响 |
| 7 对基因、信号转导的影响 |
| 8 对氧自由基的影响 |
| 9 小结 |
（10）调和气血法在骨退行性病变中的应用（论文提纲范文）
| 1 调和气血法治疗骨伤疾病渊源 |
| 2 调和气血法在骨伤科疾病中的临床应用 |
| 3 调和气血法治疗骨伤科疾病的实验研究 |
| 3.1 椎间盘退变 |
| 3.1.1 对椎间盘形态的作用 |
| 3.1.2 对椎间盘血管的作用 |
| 3.1.3 对细胞外基质的作用 |
| 3.1.4 对炎性介质的作用 |
| 3.1.5 对细胞因子的作用 |
| 3.1.6 对细胞的作用 |
| 3.1.7 对信号转导作用 |
| 3.1.8 对全身调节作用 |
| 3.2 椎体骨赘 |
| 3.3 椎体成骨 |
| 3.4 神经病变 |
| 3.5 膝骨关节炎 |
四、大鼠退变颈椎间盘组织基因表达谱的研究（论文参考文献）
- [1]MicroRNA-143-5p调控AMPK通路在颈椎间盘退行性变中的作用及机制研究[D]. 胡海权. 南昌大学, 2021(01)
- [2]基于NF-B信号通路探索针刀对椎间盘退变的影响及临床研究[D]. 樊晓明. 山东中医药大学, 2020(01)
- [3]ACDR术后随访观察及三七总皂苷调节TGF- β/Smads通路对异位骨化的影响[D]. 熊洋. 北京中医药大学, 2020(04)
- [4]益气活血方促进破裂型腰椎间盘突出髓核重吸收的机制研究[D]. 刁志君. 上海中医药大学, 2019(03)
- [5]基于“肝主筋”组方通过TNF-α/NF-κB通路干预颈椎间盘退变[D]. 陈舰舰. 南京中医药大学, 2013(05)
- [6]颈椎病中医药治疗的实验研究[J]. 陆军,王遵来,李岩. 天津中医药, 2012(03)
- [7]益气化瘀补肾法延缓椎间盘衰老的机理探讨[J]. 邢秋娟,王拥军,施杞,金国琴. 上海中医药大学学报, 2011(03)
- [8]人颈椎间盘退变基因表达谱的研究[J]. 张小卫,郭团茂,刘淼,张银刚. 西安交通大学学报(医学版), 2011(03)
- [9]中药干预椎间盘退变的实验研究概况[J]. 陈祁青,赵继荣,李红专. 中国中医骨伤科杂志, 2011(03)
- [10]调和气血法在骨退行性病变中的应用[J]. 卞琴,赵东峰,施杞,梁倩倩,卢盛,赵永见,王拥军. 上海中医药杂志, 2010(02)