一、人在胚胎期只有一只眼睛（论文文献综述）
王华[1]（2021）在《大娄山》文中指出楔子2010年的某一天,大娄山下某中级人民法院开庭审理了一起被告多达近40人的案件,近40名被告,共被指控30宗罪:非法开采黄金、非法占用农田、瞒报重大安全事故、非法买卖枪支及危险物资、故意杀人、洗钱等。因为涉及的被告人数多、犯罪时间长、犯罪行为也多,公诉机关宣读诉状就花了两个半小时,庭审时间长达一周之久。这是一个在大娄山横行了十多年的犯罪团伙,从1997年以来,他们通过行贿、拉拢腐蚀娄山县部分国家机关工作人员,将组织成员安插到党政部门和公安机关任职,建起"以黑敛财、以财贿官、以官护黑"的黑社会组织。这帮人垄断着当地黄金开采和经营,霸占着整个娄山县的黄金矿山,称霸一方。以至于号称"中国金山"的大娄山长期乌云滚滚,民怨沸腾,悲声载道。
张轶群[2]（2021）在《基于术语的知识图谱构建对译者的影响探究》文中研究表明科普文本是科技文本的分支,旨在以通俗易懂的语言向大众普及科学知识,对提高人们的科学素养有着巨大作用。但在科普文本翻译中,仍存在着术语不准确、译者认知水平有限等问题,严重影响译文质量,且目前对以上问题的实验研究较少。本文是一篇研究知识图谱对译者的影响的实验报告。作者选取了英语笔译专业研究生作为实验对象,通过翻译文本对比、翻译行为录屏以及调查问卷等手段,主要研究了知识图谱与译者认知实现、译文质量改善间的相关性,以期为提升科普文本翻译质量提供有益经验。实验结果表明,第一,在知识图谱辅助下,译者可更好地理解脑内神经发育过程以及相关科学术语,对术语实体间的关系理解也更深刻;第二,经知识图谱辅助,译者的翻译表现更佳,在科学性、文学性、通俗性三个方面做到了兼顾;第三,知识图谱可充分展示知识,能有效提高译者的认知水平,更新译者的知识结构与知识体系。第四,由于译者认知结构基础不尽相同,知识图谱的构建理念也多种多样,在未来的研究中,可灵活采取不同策略,使实验数据更精确、实验维度更加全面。
李昀桥[3]（2021）在《小鼠胚胎生血内皮细胞时空与功能异质性研究》文中研究说明造血干细胞作为造血系统的基石,具有自我更新和多谱系造血分化的能力,在个体的生命周期中可以持续产生各种谱系的血细胞,并重建受到损伤的受体造血系统。然而在胚胎发育中,造血干细胞数量稀少,发育时间窗短,并且目前缺乏对其特异性的表面标志物的认识,这使得深入研究发育造血干细胞的特性变得十分困难。目前研究表明,小鼠的造血干细胞是由主动脉-性腺-中肾区（Aorta-gonad-mesonephros region,AGM）背主动脉中一种特殊的内皮细胞亚群—生血内皮细胞在胚胎期第10天通过内皮向造血转化过程产生的,这一过程目前可以通过谱系示踪技术及实时成像系统在体内条件下观察到,更加明确了造血的内皮起源。目前已知小鼠AGM区中生血内皮细胞数量在胚胎期第10天达到高峰,随后逐渐下降;在胚胎发育过程中表达CD47、CD61、Dll4,此外,还表达Flk1、VE-Cadherin等内皮分子,缺乏CD41,CD43及CD45等造血分子的表达。Runx1作为内皮向造血转化过程中重要的转录因子,同样是生血内皮细胞的一个重要的标志物。因此,研究人员构建了Runx1+23GFP转基因小鼠来富集生血内皮细胞,同样,Gfi1-Tomato转基因小鼠也被用来探究生血内皮细胞的内皮向造血转化过程,但被这些分子标记的生血内皮细胞的造血干细胞潜能并没有得到证实。通过精确的单细胞转录组分析并结合体内功能实验验证,我们准确地用新构建的Neurl3-EGFP转基因小鼠捕捉到了具有造血干细胞功能的生血内皮细胞,进一步的通过CD41-CD43-CD45-CD31+CD201+Kit+CD44+（PK44）组合高效捕获了这群生血内皮细胞,同时在单细胞水平的体外功能实验上发现PK44细胞具有三种分化潜能,分别是单内皮潜能（约23%）、内皮和造血双向分化潜能（约2.7%）及单造血潜能（约40%）。在本研究中,我们探究了PK44细胞在造血干细胞出现前后的时空异质性和功能异质性特征。首先,我们通过对胚胎期第10天AGM区PK44细胞的单细胞转录组测序数据进行生物信息学分析,发现PK44细胞可以进一步划分为三个不同的亚群,其中两个亚群在分子表型上有明显区别,分别表现出内皮或造血偏向的特征,因此我们将这三个群体定义为内皮偏向群体、中间态群体及造血偏向群体。接下来通过分析这三个群体间的差异表达基因（Differentially expressed gene,DEG）,运用流式细胞仪索引分选（index sorting）模式并结合体外单细胞水平的功能实验筛选候选的可以区分PK44细胞功能异质性的分子,最终筛选到CD93及CD146这两个内皮相关分子,通过结合Kit与CD93或CD146的表达可以将PK44细胞群体划分为内皮和造血偏向的群体并可以较高效的富集其中的造血偏向群体,这一结果进一步在单细胞水平上的体外功能实验中得到了验证。接下来,我们发现在卵黄囊中也可以检测到PK44细胞的存在,通过分析在造血干细胞出现前后不同时间点的AGM/caudal half及卵黄囊PK44细胞特征,我们发现卵黄囊中PK44细胞表现出与AGM区相似的发育动态和功能多样性:在绝对数量上均是在胚胎期第10天达到高峰,随后逐渐下降;体外功能方面卵黄囊PK44细胞与AGM区一样,同样具有三种分化潜能,但内皮和造血双向分化潜能及单造血潜能比例均小于AGM区。同时我们发现卵黄囊PK44细胞群体在体外与OP9-DL1基质细胞共培养后,无论是造血簇的大小还是数量,均远远小于同时间点的AGM区细胞。重要的是,卵黄囊中的PK44细胞群体在体外与OP9-DL1基质细胞共培养后展现出明确的长期多谱系造血重建能力。虽然具有体外功能的相似性,卵黄囊中的PK44细胞群体表现出与AGM区中PK44细胞群体不同的转录组特征。综上所述,我们的研究描绘了以PK44为代表的生血内皮细胞的时空特征,并揭示了卵黄囊中之前并不为人所知的具有造血干细胞潜能的生血内皮细胞群体。这些发现为今后深入研究造血干细胞的不同起源和发育的分子机制提供了基础。
张银[4]（2020）在《拟穴青蟹早期发育转录组分析及Hox基因SpUbx/SpAntp/SpAbd-A功能初步研究》文中指出拟穴青蟹早期发育过程属于典型的变态发育,其幼体变态过程包括从胚胎到溞状幼体、大眼幼体再到仔蟹的过程。变态过程中,其个体形态和生活习性均发生巨大改变,最显着的形态变化是其腹部形态的改变,包括形状变扁、腹肢退化、失去游泳功能、折叠于头胸甲下方等,这种变化与拟穴青蟹底栖生活适应性密切相关。青蟹早期幼体在变态发育过程中存活率极低,这严重制约了青蟹人工养殖发展的步伐,因此对拟穴青蟹早期发育阶段的研究显得尤为必要。个体在变态过程中的形态和生活习性均发生巨大改变,然而,其变态发育的分子机制尚不清楚。为阐明拟穴青蟹幼体变态发育的分子机制,本研究首先通过转录组学手段,对拟穴青蟹早期变态发育阶段的基因及通路进行分析,探究拟穴青蟹早期变态发育阶段的关键生物学变化;然后,通过转录组数据筛选与形态发育相关的基因-Hox基因,分析Hox基因家族基因在拟穴青蟹早期不同发育时期的表达规律,并借助基因组对Hox基因簇进行基因组定位;最后,对在拟穴青蟹早期变态发育过程中形态发育相关的关键差异表达Hox基因SpUbx、SpAntp和SpAbd-A进行功能解析及调控机制研究。主要研究结果如下:1、通过对拟穴青蟹早期发育胚胎期、溞状幼体I期、溞状幼体III期、溞状幼体V期、大眼幼体和仔蟹I期的转录组测序,构建了拟穴青蟹早期变态发育时期的基因表达库,这些基因较多的参与机体催化活性、细胞过程、代谢过程和结合等功能以及嘌呤代谢、溶酶体、内吞作用、吞噬体和RNA转运等代谢通路。在拟穴青蟹幼体中高表达的胰凝乳蛋白酶可能与幼体食性的转变相关,在胚胎期高表达的基因中有较多的核糖体蛋白,钙化表皮蛋白在仔蟹I期中高表达可能与仔蟹表皮硬化相关,视蛋白在溞状幼体V期中高表达说明溞状幼体V期可能是视觉形成关键期,除此之外,还发现一些与消化、免疫、肌肉生长和能量代谢相关的基因也在不同时期中高表达。差异表达基因在各个时期的表达规律揭示了拟穴青蟹早期个体在消化功能、视觉形成和外壳形成等方面的特征变化。2、通过对拟穴青蟹早期变态发育关键的四个时期（胚胎、溞状幼体、大眼幼体和仔蟹）的转录组的比较分析发现,在胚胎期高表达的基因主要富集在核糖体、RNA转运、剪切体等与蛋白的翻译有关的通路和功能模块中,说明胚胎期中转录翻译过程较强;在溞状幼体I期上调的基因显着性的富集在无机离子转运和代谢、电压门控钙通道复合物、电压门控钠通道复合物和溶质:钠同工酶活性等与离子交换和渗透压调节相关的通路和功能模块中,同时视觉发育相关的通路--光传导也被显着富集,说明拟穴青蟹胚胎期到溞状幼体I期变态发育的过程中发生的主要变化体现在渗透压调节、视觉发育和消化功能等方面。在溞状幼体到大眼幼体及大眼幼体到仔蟹I期的发育过程中,在大眼幼体上调的基因显着富集的通路ECM受体相互作用和血管平滑肌收缩主要与肌肉生成相关,这可能与大眼幼体运动功能的加强有关。此外,还有一些与消化代谢和视觉相关的通路被显着富集。而在仔蟹中上调表达的基因主要编码钙化表皮蛋白和表皮原蛋白等,仔蟹时期表皮钙化的加强也是对底栖生活的一种适应。3、重点分析了与形态发育密切相关的Hox基因在拟穴青蟹早期不同发育时期的表达特征。从转录组数据中共筛选到122条与Homeobox相关的基因,其中有51个在拟穴青蟹早期发育过程中差异表达,包括5个簇状Hox基因Dfd、ftz、Antp、Ubx和Abd-A和一些非簇状Hox基因aristaless、cut-like、empty spiracles、engrailed、even-skipped、prospero和six1-like等,并且表达模式主要分为四类:Dfd、ftz、aristaless、empty spiracles和engrailed在胚胎期高表达,随后表达开始下降,这类基因占大多数;Antp和six1-like在胚胎期高表达,溞状幼体I期和III期表达开始下降,到溞状幼体V期又上升,大眼幼体和仔蟹I期开始表达降低;Ubx和Abd-A基因在溞状幼体V期显着高表达,其它时期无太大浮动。这些表达模式可能说明Hox基因参与了拟穴青蟹胚胎时期和幼体的形态发育。研究发现,拟穴青蟹簇状Hox基因在基因组上的位置与其它节肢动物一样是共线性的。4、Hox基因Ubx、Antp和Abd-A基因在幼体变态过程中的表达水平发生显着改变,暗示其可能参与了变态的调控。通过基因克隆、荧光定量和原位杂交等技术对Ubx、Antp和Abd-A基因的功能进行了初步研究。结果表明,SpUbx、SpAntp和SpAbd-A的c DNA全长分别为1,401 bp、1,402 bp和1,282 bp,分别编码315、236和180个氨基酸。在这三个基因的蛋白结构中,无规卷曲均占到大多数,预测这三个基因编码的蛋白均无跨膜结构域和信号肽切割位点。SpUbx和SpAntp基因在雌蟹和雄蟹的神经节、肠道、鳃和肌肉中高表达,SpAbd-A在肠道中的表达显着高于其它组织。在早期发育过程中,SpUbx、SpAntp和SpAbd-A的表达模式比较相近,在溞状幼体III期和V期的表达均较高。此外,在溞状幼体III期到V期的腹部,SpUbx和SpAntp显着低表达,SpAbd-A高表达,原位杂交结果显示三者在溞状幼体中的表达位置也主要位于胸腹部,而拟穴青蟹溞状幼体III期到V期主要处于胸腹部发育的关键阶段,由此推测,SpUbx、SpAntp和SpAbdA可能参与拟穴青蟹早期个体胸腹部发育过程。SpUbx和SpAntp在m RNA水平和蛋白水平的表达具有一致性,通过染色质免疫共沉淀技术发现UBX蛋白能与SpAntp启动子共同沉淀下来,说明Ubx可能通过结合SpAntp启动子区域来调节SpAntp基因在拟穴青蟹中的表达。综上所述,本研究构建了拟穴青蟹早期变态发育阶段的基因表达库。对变态发育关键阶段的差异表达基因进行了剖析。对与形态发育相关的Hox基因家族基因在早期不同发育时期的表达特征进行了研究,结合基因组定位,发现了Hox基因簇的共线性关系。筛选到在拟穴青蟹早期变态发育时期差异表达的Hox基因SpUbx、SpAntp和SpAbd-A基因,通过对这三个基因的克隆和表达特性分析,推测这三个基因参与拟穴青蟹早期个体胸腹部的发育,通过染色质免疫共沉淀技术发现Ubx通过结合SpAntp启动子区域来调节SpAntp基因在拟穴青蟹中的表达。本研究初步探究了拟穴青蟹幼体变态发育的调控机理,深入揭示拟穴青蟹变态发育机制和节肢动物Hox基因系统进化提供理论依据,对于促进苗种繁育工作的开展亦具有重要的现实和理论意义。
徐立超[5]（2020）在《组蛋白甲基转移酶SETD2在小鼠大脑皮层发育和自闭症样行为中的作用及机制研究》文中进行了进一步梳理哺乳动物大脑新皮层主要由6层投射神经元构成,是自然界最为复杂的结构,其在切向维度上主要由四个功能区域组成:初级运动皮层（primary motor cortex,M1）、初级躯体感觉皮层（primary somatosensory cortex,S1）、初级视觉皮层（primary visual cortex,V1）和初级听觉皮层（primary auditory cortex,A1）。功能区域的形成和特化过程被称为图式形成（arealization）,图式形成缺陷与神经系统发育疾病密切相关。自闭症谱系障碍（autism spectrum disorder,ASD）是一种神经发育疾病,核心特征为社交和语言障碍、刻板或重复行为。神经解剖学和影像学相关研究发现67%的ASD儿童患者的大脑额叶皮层区域面积增大。类Sotos综合征是一种过度生长疾病,临床上表现为智力障碍、语言迟缓、巨头症、先天性面部畸形以及自闭症。SETD2是催化组蛋白3第36位赖氨酸3甲基化（H3K36me3）的组蛋白甲基转移酶,在部分ASD患者和类Sotos综合征患者体内具有功能失活突变。然而,SETD2的H3K36me3甲基转移酶活性在大脑发育、社会行为以及类Sotos综合征发病中的作用与相关机制仍不清楚。由于Setd2全身性敲除小鼠在胚胎期10.5天致死,因此我们利用Cre/loxp系统构建了在大脑皮层敲除Setd2（Setd2Emx1-cKO、Setd2Nestin-cKO、Setd2Nex-cKO）的小鼠。首先,我们发现Setd2Emx1-cKO小鼠在旷场实验中探索能力下降;在三箱社会交互实验中具有显着的社会交互障碍;在水迷宫实验中表现为空间记忆和学习能力下降;在疲劳转棒实验中具有运动学习能力减弱表现。这些表型与类Sotos综合征和自闭症患者的部分表型（例如智力障碍和社交障碍）相一致。为了研究Setd2在小鼠大脑皮层图式形成中的功能,我们应用原位杂交（in situ hybridization）检测了Setd2条件性敲除小鼠大脑皮层中区域特异标志分子的表达变化。在出生后第0天（P0）的Setd2Emx1-cKO、Setd2Nestin-cKO、Setd2Nex-cKO小鼠大脑皮层中,体感区域特异的标志分子Ephrin-A5在体感皮层的表达水平显着降低;运动区域和视觉区域特异的标志分子Lmo4、Epha7在尾侧运动皮层（caudal motor cortex）的表达水平明显下降。在P0 Setd2Emx1-cKO、Setd2Nestin-cKO小鼠大脑皮层中,体感区域特异的标志分子Rorβ的表达水平在扣带回皮层显着增加。在P7 Setd2Emx1-eKO小鼠大脑中,Lmo4在体感区域第V层的表达范围明显扩大,在额叶皮层的表达明显减少;Cad8+细胞的层次分布特征消失;Rorβ的表达水平显着下降。5-HT（感觉区域特异标志分子）免疫组织化学染色结果显示,在Setd2Emx1-cKO小鼠大脑皮层中,运动区域向后侧延展,体感区域向内侧和后侧移位,视觉区域向后侧压缩,前-后侧桶状皮层（antero-lateral barrel subfield,ALBSF）几乎消失;在Setd2Nex-cKO小鼠大脑皮层中,体感区域向内侧移位,前-后侧桶状皮层几乎消失。以上结果表明Setd2对于小鼠大脑皮层图式形成的正确发生至关重要。在正常小鼠中,运动皮层和体感觉皮层的第Ⅳ层神经元分别接收来自腹外侧核（the ventral lateral nucleus,VL）和腹后侧核（the ventral posterior nucleus,VP）的丘脑-皮层轴突输入。同时,运动皮层和体感皮层的第Ⅵ层神经元也发出终止于VL和VP的皮层-丘脑轴突输出。然而在Setd2Emx1-cKO小鼠皮层中,丘脑-皮层纤维束分布在第Ⅱ-Ⅵ层;皮层-丘脑纤维束无法正常投射到对应的丘脑核团,而是混合重叠在内囊区域。这些结果说明Setd2缺失会导致小鼠皮层-丘脑-皮层环路构建过程出现异常。转录组测序（RNA-seq）结果表明,成簇原钙粘蛋白家族基因（clustered protocadherins,cPcdh）在Setd2Emx1-cKO小鼠皮层中的表达水平显着下降,而且cPcdh杂合敲除小鼠（Pcdhαβγ+/-）表现出与Setd2Emx1-cKO小鼠类似的图式形成缺陷。ChIP-seq结果表明H3K36me3修饰在Setd2Emx1-cKO小鼠皮层cPcdh的部分增强子区域明显下降,而这种修饰的改变会导致DNA从头（de novo）甲基转移酶DNMT3A/B（特别是DNMT3B）在这些增强子区域的结合增加。最后,我们构建了类Sotos综合征患者具有的SETD2点突变体（SETD2L1815W）。应用敲除SETD2的293T细胞系（293TSETD2-KO）行回复实验发现该点突变能使SETD2失去催化H3K36me3的活性。子宫电穿孔实验表明cPcdh在皮层投射神经元的表达依赖于SETD2的H3K36me3甲基转移酶功能。本研究首次系统揭示了 SETD2在大脑皮层发育中的作用,不仅为阐释表观遗传修饰在图式形成中的功能提供了直接证据,更为深入理解类Sotos综合征和自闭症的发病机理提供了强有力的分子基础和动物模型支撑。
张天豪[6]（2020）在《金属蛋白酶ADAMTS18在小鼠胚胎发育早期的表达谱系及其在血管新生中的作用研究》文中研究说明ADAMTS（A Disintegrin-like And Metalloproteinase with Thrombospondin type1 motifs）是一类含I型血小板反应蛋白模体（TSP）的解整合素金属蛋白酶,在人类中已发现19个家族成员,它们通过切割或修饰细胞外基质成分（Extracellular matrix,ECM）,在胚胎发育、组织形态发生、血管生物学、肿瘤等多种病生理过程中发挥重要作用。ADAMTS18是一种“孤儿ADAMTSs（orphan ADAMTSs）”,即不知功能或底物的ADAMTS家族成员。课题组自2010年起对ADAMTS18生物学功能展开系统研究,并于2017年成功构建了Adamts18基因剔除（knockout,KO）小鼠模型,为进一步阐明其功能提供了有力的模式生物工具。课题组已发表的数据显示,ADAMTS18与内脏脂肪组织发育、颈动脉系统分化及神经元树突的形态发生密切相关,提示ADAMTS18可能在胚胎发育早期起重要作用,但其在胚胎发育早期不同组织中的时空表达特性及其在血管发育中的作用仍不清楚,亟待深入探究。本研究以Adamts18基因剔除的小鼠与adamts18基因敲低的斑马鱼为模型,结合分子生物学与形态学研究方法,对ADAMTS18在小鼠胚胎发育早期的表达谱系及其在血管新生中的作用进行了探究。研究方法包括:1.通过RNA原位杂交（in situ hybridization,ISH）的方法,检测了Adamts18 mRNA在小鼠胚胎发育早期、不同组织中的时空表达特点。2.通过小鼠视网膜血管新生实验及基质栓（Matrigel plug）皮下血管新生实验,观察ADAMTS18对血管新生的影响。3.构建了adamts18 knockdown斑马鱼模型,通过显微镜观察、RT-PCR以及qRT-PCR等实验方法对Adamts18在斑马鱼胚胎发育早期器官发生及血管新生中的作用进行探究。结果显示,小鼠胚胎发育早期,Adamts18 mRNA在头部主要表达于视囊泡及耳囊泡的假复层上皮,中脑的翼板上皮（E10.5）及连合下器官（E11.5）。在颈部,Adamts18 mRNA主要表达于第一鳃弓咽上皮（E9.5-E11.5）、第二鳃弓特化间充质细胞（E10.5-E11.5）,及第三鳃弓血管上皮（E11.5）。在躯干部,Adamts18mRNA主要表达于十二指肠腔上皮（E10.5）,肺芽上皮及间充质细胞（E11.5）,肝原基上皮及间充质细胞（E11.5）,中肾管囊泡特化间充质上皮（E11.5）,背主动脉上皮及间充质细胞（E10.5-E11.5）。在E14.5-E16.5,Adamts18 mRNA高表达于下磨牙的牙间充质细胞及外层牙釉质上皮。在E16.5,Adamts18 mRNA高表达于舌头的叶状乳头。此外,Adamts18 mRNA瞬时表达于E13.5肝小叶间静脉,E14.5椎-基底动脉及出生后1天（P1）的颈总静脉血管内皮。ADAMTS18缺失会引起小鼠视网膜毛细血管网络形成障碍。小鼠皮下Matrigel plug血管新生实验显示,Adamts18 KO小鼠皮下Matrigel plug中血管新生能力较WT小鼠显着降低。在adamts18 knockdown斑马鱼模型上,Adamts18缺乏会导致斑马鱼胚胎脑室扩大、后脑水肿、眼部缺陷,胚胎躯干血管及尾静脉丛发育异常以及尾静脉血液淤滞;异常的血管表型与TGF-β,Slit/Robo,Dll4/Notch,Cox2及Fgfr等多种血管新生分子相关。综上所述,本研究首次证明了Adamts18在小鼠器官发生的过程中具有广泛表达,并在血管网络形成阶段起着至关重要的作用。为进一步研究ADAMTS18的生物学功能提供了新的实验依据,也为相关疾病的诊治提供了新的思路。
刘力瑛[7]（2020）在《BmFoxA调控家蚕丝腺发育的研究》文中进行了进一步梳理家蚕是鳞翅目的一种重要经济昆虫,其在上蔟期吐出的蚕丝蛋白经工艺加工制成丝织品,具有重要的经济价值。中国不仅是世界蚕丝业的起源地,也是世界丝绸产量大国之一。举世闻名的丝绸之路不仅带动了中国的经济发展,还加强了中国与其他国家的文化交流。蚕丝业因此被誉为我国的第五大发明。丝腺是家蚕体内能够分泌蚕丝蛋白的唯一器官,根据其功能和结构的不同,丝腺可分为前部丝腺、中部丝腺和后部丝腺三个部分。后部丝腺分泌的丝素蛋白,被中部丝腺分泌的丝胶蛋白包裹后,经由前部丝腺吐出体外,形成蚕丝。不同品种蚕的产丝量有所不同,这主要是由于不同品种蚕的丝腺发育存在差异。高产丝量家蚕品种的选育一直是蚕业研究的重要部分,提高家蚕的产丝量有利于蚕丝业的发展。因此,研究丝腺发育的机制有利于我们更好的了解丝腺发育与家蚕产丝量之间的关系,为家蚕高产丝量品种的遗传改良提供理论指导,具有重要的意义。丝腺的发育主要包括丝腺胚胎发育和胚后发育。丝腺在胚胎期形成一定数目的丝腺细胞,在幼虫期丝腺进行核内复制,细胞数目不再发生改变,细胞体积增大。近年来关于丝腺发育的研究主要集中于丝腺的核内复制。已有研究表明,Ras1CA、Myc等基因能够调控丝腺的核内复制,影响细胞大小。Bm Fox A基因是在家蚕丝腺中鉴定的Fox A家族转录因子。早期文献报道,Bm Fox A在家蚕体节的异位表达会导致丝腺的异位诱导,表明Bm Fox A对丝腺的发育可能存在调控作用。此外,在Ras1CA过表达的家蚕中也检测到Bm Fox A的上调表达。基于以上的研究结果,我们猜测Bm Fox A基因可能参与了丝腺的发育调控。我们设计实验对这一猜测进行了研究,研究结果如下:1.转基因敲除个体的获得和检测我们构建了Bm Fox A转基因敲除g RNA载体,胚胎期显微注射,筛选获得Bm Fox A的g RNA阳性个体,将其与丝素基因启动子驱动表达Cas9蛋白的家蚕杂交,通过对杂交后代眼部荧光筛选获得g RNA和Cas9双阳性家蚕。通过检测,我们发现双阳性家蚕的基因组中Bm Fox A基因与野生型相比发生了不同片段的缺失。进一步对双阳性个体后部丝腺中Bm Fox A蛋白的表达情况进行Western blotting检测。结果显示,与野生型相比,双阳性家蚕后部丝腺中Bm Fox A蛋白的表达量显着下调。结果表明我们成功获得了后部丝腺特异性敲除Bm Fox A的转基因家蚕,我们将其命名为Bm Fox A-PSG-M。2.后部丝腺特异性敲除Bm Fox A对丝腺发育的影响将Bm Fox A-PSG-M转基因家蚕作为材料,观察其丝腺的发育情况。与野生型家蚕的后部丝腺相比,Bm Fox A-PSG-M家蚕的后部丝腺发育异常,表现为后部丝腺缩短,呈现为念珠状,而非光滑的圆柱状。鬼笔环肽染色显示Bm Fox A-PSG-M家蚕的后部丝腺细胞更小,细胞排列杂乱,大小不均一,差异较大。DAPI染色显示,与野生型相比,Bm Fox A-PSG-M家蚕的后部丝腺细胞核核内复制能力较低。Bm Fox A-PSG-M家蚕后部丝腺的总DNA含量显着低于野生型家蚕。这些结果表明Bm Fox A参与了对家蚕后部丝腺的发育调控。3.后部丝腺特异性敲除Bm Fox A对家蚕蚕丝蛋白合成和分泌的影响由于Bm Fox A-PSG-M家蚕后部丝腺发育异常,可能会对家蚕的吐丝行为和经济性状产生影响。因此,我们观察了Bm Fox A-PSG-M家蚕的吐丝行为,检测了蚕丝蛋白中丝素丝胶的含量,并统计了蚕茧的经济性状。我们发现,部分Bm Fox A-PSG-M家蚕有吐丝动作,但不能正常吐出蚕丝,形成裸蛹;另一部分家蚕能够吐出蚕丝,形成较薄的蚕茧。与野生型蚕茧相比,Bm Fox A-PSG-M家蚕蚕茧中丝素含量显着降低,低于20%,蚕茧中丝胶含量较高。Bm Fox A-PSG-M家蚕的茧层重和茧层率显着降低。4.中部丝腺特异性敲除Bm Fox A对丝腺发育的影响我们将筛选到的Bm Fox A g RNA阳性个体与Ser1基因驱动表达的Cas9蛋白阳性个体杂交,经过荧光筛选获得了双阳性个体。Western blotting检测表明,与野生型相比,双阳性个体中部丝腺Bm Fox A蛋白表达水平显着降低,Bm Fox A被成功下调表达。我们将获得的转基因个体命名为Bm Fox A-MSG-M。鬼笔环肽染色发现,与野生型相比,Bm Fox A-MSG-M家蚕中部丝腺发育异常,其中部丝腺的后部明显缩短变细,细胞变小,大小不均一,排列杂乱。5.Bm Fox A调控丝腺发育机制初探我们推测Bm Fox A基因可能调控了家蚕丝腺细胞周期和细胞凋亡,进而影响了丝腺发育。在家蚕细胞中过表达Bm Fox A,发现与DNA复制相关的细胞周期因子Cyclin A、Cyclin D和Cyclin E均上调表达,细胞凋亡相关基因caspase1、caspase3、caspase4和caspase9的表达则受到抑制。因此我们猜测Bm Fox A可能通过促进丝腺细胞核内复制,同时抑制细胞凋亡来调控丝腺的发育。为进一步揭示Bm Fox A调控丝腺发育的分子机制,我们提取了五龄第三天野生型家蚕与Bm Fox A-PSG-M家蚕的后部丝腺RNA,对其进行转录组测序。q PCR证实转录组数据可靠。我们进一步对转录组数据进行差异基因分析,发现共有1117个差异表达基因,其中,在Bm Fox A-PSG-M家蚕中上调表达基因有1010个,下调基因107个。我们对差异基因进行了GO功能富集分析,发现GO功能主要富集在细胞膜组分、细胞粘附、脂质运输和糖脂代谢等方面,说明Bm Fox A基因参与调控了家蚕体内多种生理生化过程。我们对差异基因也进行了KEGG信号通路富集分析,发现主要富集在糖代谢相关通路,如糖酵解、丙酮酸代谢等。我们推测Bm Fox A可能通过参与糖代谢通路从而调控了丝腺细胞内DNA复制和丝腺细胞的发育。
郭瑞[8]（2020）在《转录因子Lhx9和Lhx4在斑马鱼胚胎发生中的表达模式及其在视网膜发育中的功能研究》文中研究表明许多人类遗传性疾病都与LIM-同源异形框（LIM homeobox,LHX）基因有关。目前关于Lhx9和Lhx4在脊椎动物胚胎发育过程中的功能研究尚不完整,主要源于对其在胚胎发育中的时空表达模式不够清楚。此外,研究发现80%以上Lhx基因与视网膜的发育有关。然而,目前尚无研究报道Lhx9和Lhx4在斑马鱼视网膜中的表达模式和调控功能。本课题首先通过利用整胚原位杂交和切片原位杂交检测lhx9和lhx4在斑马鱼胚胎及视网膜发育中的表达模式。结果发现在24hpf到5dpf的斑马鱼胚胎中,lhx9和lhx4的表达随胚胎发育均呈动态变化。lhx9不但在大脑中表达,而且在视网膜内核层的内侧,心脏和胸鳍的发育过程中有较长时期的表达;lhx4不但在斑马鱼胚胎的大脑和脊髓中表达,而且在听囊发育的早期瞬时表达,在视网膜发育的后期lhx4持续在内核层的外侧和外核层表达。本课题通过morpholino（MO）技术成功构建了敲减lhx9或lhx4的斑马鱼模型,结果发现MO敲减lhx9不影响斑马鱼视网膜内不同类型细胞的分化发育以及视网膜结构和功能的发育。MO敲减lhx4导致斑马鱼胚胎出现类似人类遗传性垂体疾病（如联合性垂体激素缺乏症）的表型,无法用于研究Lhx4在视网膜发育过程中的功能。利用vivo-MO成功构建了敲减视网膜内lhx4的斑马鱼模型。结果发现敲减视网膜内lhx4会抑制内核层中Parvalbumin+无长突细胞和外核层中Rhodopsin+视杆感光细胞的分化形成,这些减少的视网膜细胞可能是通过高表达vsx2转化为过量的ON视锥双极细胞,从而损伤斑马鱼的视觉功能。本课题不仅首次全面展示了lhx9和lhx4在斑马鱼胚胎和视网膜发育中的表达模式,有助于进一步研究这两个转录因子在脊椎动物胚胎和视网膜发育中的重要功能;还首次利用MO敲减技术研究了lhx9和lhx4对斑马鱼视网膜发育的调控作用,为研究脊椎动物视网膜的发育调控机制提供了实验基础。因此,本课题有利于全面理解转录因子Lhx9和Lhx4在脊椎动物胚胎和视网膜发育中的表达模式和调控功能。
陈崇正[9]（2020）在《美人城手记》文中进行了进一步梳理在人工智能得到充分发展之际,一座城堡被寄托了人类"永生"的梦想:将人脑切割下来保存在安乐桶中,并匹配智能肉体,改造为后人类。其时人类在权力争斗中制造了一个机器脑"石敢当",它学习人类的情感模式并得到完全升级,从而爆发了以消灭人类为目的的机器人战争……这是一部糅合了志怪、悬疑、科幻等多种类型文学手法的小说,在强劲的想象中书写人类需共同面对的生死问题,展示了现在和未来几代人的精神图景。
彼得·詹姆斯,王好强,黄力平[10]（2018）在《完美人类(下)》文中研究说明Copyright ? Really Scary Books Ltd/Peter James,2011Copyright licensed by Blake Friedmann Literary,TV and Film Agency Ltd through Andrew Nurnberg Associates International Limited Simplified Chinese translation copyright?2018 by Yilin Press,Ltd All rights reserved.着作权合同登记号图字:10—2017—548号第五十五章在夜色的掩护下,"信徒"隐藏在密密匝匝的灌木丛中,听着房子那边传来的笑声。楼下窗户里倾泻出来的灯光可以照到草坪上,但是,那灯
二、人在胚胎期只有一只眼睛（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、人在胚胎期只有一只眼睛（论文提纲范文）
（1）大娄山（论文提纲范文）
| 楔子 |
| 1 |
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| 8 |
| 9 |
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（2）基于术语的知识图谱构建对译者的影响探究（论文提纲范文）
| Abstract |
| 摘要 |
| 1.Introduction |
| 1.1 Research Background |
| 1.2 Research Purpose and Significance |
| 1.3 Research Questions,Methods,and Innovative Aspects |
| 1.4 Structure of the Thesis |
| 2.Literature Review |
| 2.1 Research Status Home and Abroad |
| 2.2 Research Status of Related Concepts |
| 2.2.1 Research Status of Knowledge Graph |
| 2.2.2 Research Status of Popular Science Text |
| 2.2.3 Research Status of Terminology |
| 2.2.4 Research Status of Schema Theory |
| 3.Experimental Design |
| 3.1 Selection of Text |
| 3.2 Selection of Participants and Evaluator |
| 3.3 Preparation of Experimental Tools |
| 3.3.1 Memo Q for the Translation and Terminology Extraction |
| 3.3.2 The Brain for the Making of Knowledge Graph |
| 3.3.3 Wenjuanxing for the Making of Questionnaires |
| 3.3.4 Camtasia for the Screen Captures and Analysis of Translation Process |
| 3.4 Experiment Procedures |
| 4.Data Analysis and Discussion |
| 4.1 Analysis of the Target Texts |
| 4.2 Analysis of Scores of Evaluator |
| 4.3 Analysis of the Questionnaires |
| 4.4 Analysis of the Screen Capture Materials |
| 5.Major Findings and Conclusion |
| References |
| Appendices |
| AppendixⅠ:Source Text(and Target Text) |
| AppendixⅡ:Term List |
| AppendixⅢ:Questionnaires |
| Appendix Ⅳ:The Knowledge Graphs |
| Acknowledgements |
（3）小鼠胚胎生血内皮细胞时空与功能异质性研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1、造血干细胞发育的研究进展 |
| 1.1 原始造血 |
| 1.2 短期定向造血 |
| 1.3 以造血干细胞生成为标志的定向造血 |
| 1.3.1 以造血干细胞生成为标志的定向造血产生的位点 |
| 1.3.2 可能产生造血干细胞的其他造血位点 |
| 1.3.3 造血干细胞前体 |
| 1.4 造血干细胞发育微环境 |
| 2、生血内皮细胞的研究进展 |
| 2.1 生血内皮细胞的起源 |
| 2.2 生血内皮细胞的分子特征及功能异质性 |
| 2.3 生血内皮细胞的内皮向造血转化过程机制 |
| 3、流式细胞术的研究进展 |
| 3.1 流式细胞术的发展史 |
| 3.2 流式index sorting技术的应用 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验小鼠 |
| 1.1.2 耗材与试剂 |
| 1.1.2.1 基础试剂 |
| 1.1.2.2 流式抗体 |
| 1.1.2.3 细胞因子 |
| 1.1.3 仪器与设备 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 体外功能实验 |
| 1.2.1.1 小鼠胚胎取材 |
| 1.2.1.2 胚胎组织单细胞化 |
| 1.2.1.3 流式抗体标记及分选 |
| 1.2.1.4 基质细胞共孵育培养 |
| 1.2.1.5 免疫组织化学染色 |
| 1.2.1.6 集落形成实验 |
| 1.2.2 体内功能实验 |
| 1.2.2.1 基质细胞共孵育培养 |
| 1.2.2.2 移植实验 |
| 1.2.2.3 外周血嵌合率检测 |
| 1.2.2.4 多组织多系嵌合率检测 |
| 1.2.2.5 二次移植 |
| 1.2.3 单细胞RNA-seq文库的构建 |
| 1.2.4 单细胞RNA-seq数据质量控制 |
| 1.2.5 细胞类型检测与降维 |
| 1.2.6 差异表达基因(Differentially expressed gene,DEG)与群体表面标志物的鉴定 |
| 1.2.7 基因本体(Gene ontology,GO)分析 |
| 1.2.8 数据处理 |
| 1.2.9 数据分析及实验人员分工 |
| 第二章 实验设计 |
| 第三章 AGM区中PK44细胞的功能异质性研究 |
| 3.1 AGM区中PK44细胞的单细胞转录组特征 |
| 3.2 富集AGM区PK44群体中的造血偏向群体 |
| 第四章 AGM区及卵黄囊中PK44细胞的发育动态 |
| 第五章 AGM区及卵黄囊中PK44细胞的体内外功能差异 |
| 第六章 卵黄囊中PK44细胞的转录组特征 |
| 第七章 结论与展望 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 讨论与展望 |
| 参考文献 |
| 作者在学期间取得的学术成果 |
| 主要简历 |
| 致谢 |
（4）拟穴青蟹早期发育转录组分析及Hox基因SpUbx/SpAntp/SpAbd-A功能初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 拟穴青蟹早期发育研究 |
| 1.1.1 拟穴青蟹的早期发育模式 |
| 1.1.2 拟穴青蟹早期发育过程中重要的生物学过程 |
| 1.1.2.1 拟穴青蟹早期发育时期的蜕皮 |
| 1.1.2.2 拟穴青蟹早期发育时期的形态变化 |
| 1.1.2.3 拟穴青蟹早期发育时期的食性转变 |
| 1.1.3 拟穴青蟹早期发育和幼体变态的研究进展 |
| 1.2 转录组测序及其在拟穴青蟹早期发育研究中的应用 |
| 1.2.1 组学技术和生物信息学的快速发展 |
| 1.2.2 拟穴青蟹的组学研究进展 |
| 1.2.3 组学解析在虾蟹早期发育研究中的应用 |
| 1.3 Hox基因家族在甲壳动物中的研究进展 |
| 1.3.1 无脊椎动物的Hox基因研究 |
| 1.3.2 Hox基因在甲壳动物中的表达模式 |
| 1.4 本研究的研究目的、意义及主要研究内容 |
| 第二章 拟穴青蟹早期不同发育时期的转录组研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 胚胎及幼体的取样 |
| 2.2.2 总RNA的提取 |
| 2.2.3 转录组测序 |
| 2.2.4 测序数据处理与分析 |
| 2.2.5 功能注释、GO分类与代谢通路分析及基因表达量分析 |
| 2.2.6 qRT-PCR定量验证 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 拟穴青蟹早期形态变化显微观察 |
| 2.3.2 拟穴青蟹早期发育时期转录组测序 |
| 2.3.2.1 转录组整体结果分析 |
| 2.3.2.2 基因功能注释 |
| 2.3.2.3 基因表达分析及相关性分析 |
| 2.3.2.4 差异表达基因功能注释 |
| 2.3.2.5 差异表达基因聚类分析 |
| 2.3.2.6 拟穴青蟹早期不同发育时期共差异表达基因分析 |
| 2.3.2.7 qRT-PCR验证 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 拟穴青蟹早期变态发育时期的比较转录组分析 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 基因的差异表达分析 |
| 3.2.2 差异表达基因的聚类及功能注释 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 胚胎期(E)与溞状幼体I期(Z1)的差异表达基因解析 |
| 3.3.1.1 EvsZ1 上调DEGs的功能注释 |
| 3.3.1.2 EvsZ1 下调DEGs的功能注释 |
| 3.3.2 溞状幼体V期(Z5)与大眼幼体(M)的差异表达基因解析 |
| 3.3.2.1 Z5 vs M上调DEGs的功能注释 |
| 3.3.3.2 Z5 vs M下调DEGs的功能注释 |
| 3.3.3 大眼幼体(M)与仔蟹(C1)的差异表达基因解析 |
| 3.3.3.1 Mvs C1 上调DEGs的功能注释 |
| 3.3.3.2 Mvs C1 下调DEGs的功能注释 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 Hox基因簇筛选及表达分析 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 拟穴青蟹Hox基因的筛选 |
| 4.3.2 簇状Hox基因在拟穴青蟹早期发育过程中的表达 |
| 4.3.3 非簇状homeobox基因在拟穴青蟹早期发育过程中的表达 |
| 4.3.4 在拟穴青蟹早期发育过程中差异表达的Hox基因 |
| 4.3.5 Hox基因在拟穴青蟹基因组中的定位 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第五章 Hox基因Ubx/Antp/Abd-A基因的克隆和表达特性分析及互作关系研究 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.1.1 主要仪器和设备 |
| 5.2.1.3 主要试剂 |
| 5.2.1.4 幼体样品的采集 |
| 5.2.1.5 拟穴青蟹各组织样品的采集 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.2.2.1 总RNA的提取 |
| 5.2.2.2 第一链c DNA的合成 |
| 5.2.2.3 基因克隆 |
| 5.2.2.3.1 基因片段的验证 |
| 5.2.2.3.2 基因两端序列的克隆 |
| 5.2.2.3.3 序列拼接 |
| 5.2.2.3.4 生物信息学分析 |
| 5.2.2.3.5 qRT-PCR |
| 5.2.2.3.6 数据统计 |
| 5.2.2.4 整体原位杂交 |
| 5.2.2.4.1 探针的制备 |
| 5.2.2.4.2 整体原位杂交 |
| 5.2.2.5 多克隆抗体的制备 |
| 5.2.2.6 Western blotting |
| 5.2.2.7 RNA干扰 |
| 5.2.2.8 染色质免疫共沉淀 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 SpUbx、SpAntp和 SpAbd-A基因的克隆和生物信息学分析 |
| 5.3.1.1 SpUbx基因的c DNA全长序列和特征分析 |
| 5.3.1.2 SpAntp基因的c DNA全长序列和特征分析 |
| 5.3.1.3 SpAbd-A基因的c DNA全长序列和特征分析 |
| 5.3.2 SpUbx、SpAntp和 SpAbd-A基因的时空表达特性分析 |
| 5.3.3 SpUbx、SpAntp和 SpAbd-A基因在雌雄腹肢中的表达 |
| 5.3.4 SpUbx、SpAntp和 SpAbd-A基因在早期个体头胸部和腹部的表达 |
| 5.3.5 SpUbx、SpAntp和 SpAbd-A基因在早期个体中的表达定位 |
| 5.3.6 SpUBX和 SpANTP的蛋白表达 |
| 5.3.7 RNA干扰SpUbx基因的表达 |
| 5.3.8 SpUbx和 SpAntp的相互作用研究 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 第六章 总结、创新与展望 |
| 6.1 全文总结 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 附录 |
| 一、个人简介 |
| 二、攻读博士期间发表论文情况 |
| 三、攻读博士期间参与项目情况 |
| 四、攻读博士期间参加学术会议情况 |
| 五、攻读博士期间获得的荣誉和奖励 |
| 致谢 |
（5）组蛋白甲基转移酶SETD2在小鼠大脑皮层发育和自闭症样行为中的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 大脑皮层的构成 |
| 1.2 大脑皮层的层次发育 |
| 1.3 大脑皮层图式形成 |
| 1.3.1 前脑图式形成组织中心 |
| 1.3.2 “前部化”组织中心 |
| 1.3.3 “背/后侧化”组织中心 |
| 1.3.4 早期成形转录因子对图式形成的作用 |
| 1.3.5 其他转录因子对图式形成的作用 |
| 1.3.6 丘脑-皮层束投射建立 |
| 1.3.7 丘脑-皮层纤维束对图式形成的作用 |
| 1.3.8 表观遗传调控机制对图式形成的作用 |
| 1.4 组蛋白甲基转移酶SETD2 |
| 1.4.1 SETD2简介 |
| 1.4.2 SETD2的蛋白结构 |
| 1.4.3 SETD2的生物学功能 |
| 1.4.4 SETD2突变导致恶性肿瘤疾病的发生 |
| 1.4.5 SETD2通过甲基化α-微管蛋白和F-肌动蛋白调控细胞分裂和迁移 |
| 1.4.6 Setd2是小鼠早期发育关键基因 |
| 1.5 cPcdh |
| 1.5.1 cPcdh简介 |
| 1.5.2 DNA甲基化对cPcdh的调控 |
| 1.5.3 CTCF对cPcdh的调控 |
| 1.5.4 其他蛋白对cPcdh的调控 |
| 1.5.5 cPcdh在轴突导向和延伸中的作用 |
| 1.5.6 cPcdh在树突分枝中的作用 |
| 1.6 自闭症和类Sotos综合征 |
| 1.6.1 自闭症 |
| 1.6.2 类Sotos综合征患者具有SETD2突变 |
| 1.7 本文的研究目的、研究内容与意义 |
| 第二章 实验材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 细胞系、菌株、载体、cDNA、试剂盒、病毒 |
| 2.1.3 实验动物 |
| 2.1.4 主要试剂 |
| 2.1.5 相关抗体 |
| 2.1.6 细胞培养相关试剂 |
| 2.1.7 探针引物序列 |
| 2.1.8 其他引物序列 |
| 2.1.9 相关溶液配制 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 克隆构建 |
| 2.2.2 地高辛(DIG)标记探针制备 |
| 2.2.3 小鼠灌流及切片(冠状和矢状) |
| 2.2.4 切向切片制备 |
| 2.2.5 原位杂交(In situ hybridization) |
| 2.2.6 小鼠行为学实验 |
| 2.2.7 整体(Whole-mount)原位杂交 |
| 2.2.8 5-HT免疫组织化学染色 |
| 2.2.9 免疫荧光染色 |
| 2.2.10 尼氏染色(Nissl staining) |
| 2.2.11 立体定位注射 |
| 2.2.12 RNA提取 |
| 2.2.13 RNA逆转录 |
| 2.2.14 定量PCR |
| 2.2.15 染色质免疫共沉淀(ChIP)及ChIP-qPCR |
| 2.2.16 细胞转染 |
| 2.2.17 蛋白质免疫印迹 |
| 2.2.18 子宫电穿孔 |
| 2.2.19 单细胞悬液制备及细胞分选 |
| 2.2.20 链特异性反转录、预扩增、定量PCR |
| 2.2.21 统计学分析 |
| 第三章 实验结果 |
| 3.1 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠具有部分类Sotos综合征表型 |
| 3.1.1 构建Setd2条件性敲除小鼠 |
| 3.1.2 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠具有社交障碍 |
| 3.1.3 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠学习和空间记忆能力下降 |
| 3.1.4 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠运动学习能力下降 |
| 3.1.5 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠不具有刻板行为 |
| 3.1.6 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠胡须垫肌肉功能正常 |
| 3.2 Setd2调控大脑皮层图式形成过程 |
| 3.2.1 Setd2在发育过程中的大脑广泛表达 |
| 3.2.2 Setd2可能在神经前体细胞水平和神经元水平调控大脑皮层图式形成 |
| 3.2.3 P7 Setd2~(Emx1-cKO)小鼠大脑偏小 |
| 3.2.4 区域特异性标志分子在出生后7天的Setd2~(Emx1-cKO)小鼠大脑中的分布发生明显改变 |
| 3.2.5 Setd2缺失导致小鼠大脑皮层功能区域的形态和位置发生改变 |
| 3.2.6 早期转录因子在Setd2~(Emx1-cKO)小鼠大脑皮层中的表达未发生改变 |
| 3.3 Setd2缺失导致小鼠大脑外侧浅层神经元排列异常 |
| 3.4 Setd2缺失不改变大脑皮层各层次神经元的数量 |
| 3.5 Setd2缺失不影响神经前体细胞自我更新和中间前体细胞的生成 |
| 3.6 Setd2调控皮层-丘脑-皮层环路的形成 |
| 3.7 SETD2失活导致cPcdh基因下调 |
| 3.8 cPcdh杂合突变小鼠大脑皮层图式形成异常 |
| 3.9 SETD2以依赖于H3K36me3催化活性的方式维持cPcdh的表达 |
| 3.9.1 SETD2在发育中大脑皮层维持H3K36me3的修饰 |
| 3.9.2 H3K36me3在Setd2~(Emx1-cKO)小鼠大脑背侧皮层基因组HS位点的分布显着下降 |
| 3.9.3 DNMT3A/B在Setd2~(Emx1-cKO)小鼠大脑背侧皮层基因组部分HS位点的结合增加 |
| 3.9.4 SETD2~(L1815W)点突变导致其失去H3K36me3催化活性 |
| 3.9.5 cPcdh的表达依赖于SETD2的H3K36me3催化活性 |
| 3.10 机制模型 |
| 第四章 总结与展望 |
| 4.1 总结 |
| 4.1.1 SETD2缺失导致小鼠产生类Sotos综合征表型 |
| 4.1.2 SETD2缺失导致小鼠大脑皮层图式形成缺陷 |
| 4.1.3 SETD2缺失导致小鼠大脑外侧皮层浅层神经元排列紊乱 |
| 4.1.4 SETD2缺失导致小鼠皮层-丘脑-皮层神经环路异常 |
| 4.1.5 Pcdhαβγ~(+/-)小鼠大脑皮层图式形成异常 |
| 4.1.6 H3K36me3修饰在Setd2~(Emx1-cKO)小鼠大脑皮层cPcdh基因的HS位点分布下降 |
| 4.1.7 cPcdh的转录激活依赖于SETD2的H3K36me3甲基转移酶活性 |
| 4.2 展望 |
| 4.2.1 SETD2功能缺失改变大脑皮层神经元的分子特性 |
| 4.2.2 SETD2调控皮层-丘脑-投射环路 |
| 4.2.3 cPcdh转录水平的下调可能与增强子区域的DNA甲基化相关 |
| 4.2.4 SETD2~(L1815W)突变体无H3K36me3催化活性 |
| 4.2.5 SETD2及其介导的H3K36me3修饰可能是治疗类Sotos综合征的靶点 |
| 主要缩略词表 |
| 参考文献 |
| 攻博期间发表的科研成果目录 |
| 致谢 |
（6）金属蛋白酶ADAMTS18在小鼠胚胎发育早期的表达谱系及其在血管新生中的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 前言 |
| 1.1 血管新生基本过程 |
| 1.2 血管新生的分子调控 |
| 1.3 血管发育模型 |
| 1.3.1 小鼠视网膜血管发育 |
| 1.3.2 Matrigel plug模型 |
| 1.3.3 斑马鱼胚胎中ISV的形成过程 |
| 1.3.4 斑马鱼胚胎中CVP的形成过程 |
| 1.4 ADAMTS家族成员简介 |
| 1.4.1 ADAMTS家族成员结构与分类 |
| 1.4.2 ADAMTS家族成员在血管新生中的作用 |
| 1.5 ADAMTS18 研究现状 |
| 1.5.1 ADAMTS18 简介 |
| 1.5.2 ADAMTS18 对血管新生影响的研究背景 |
| 1.6 利用斑马鱼研究Adamts18 在血管新生中作用的优势 |
| 1.7 MO Knockdown原理 |
| 1.8 研究目的 |
| 第二章 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 实验耗材 |
| 2.4 实验试剂 |
| 2.5 实验试剂配制 |
| 第三章 实验方法 |
| 3.1 小鼠的饲养与繁殖 |
| 3.2 基因型鉴定 |
| 3.2.1 DNA的提取 |
| 3.2.2 PCR |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳 |
| 3.2.4 小鼠基因型鉴定结果分析 |
| 3.3 RNA原位杂交(ISH) |
| 3.4 小鼠视网膜血管新生观察 |
| 3.4.1 视网膜铺片制作 |
| 3.4.2 免疫荧光 |
| 3.5 小鼠皮下基质栓(Matrigel plug)血管新生检测 |
| 3.6 斑马鱼的饲养和繁殖 |
| 3.7 反义寡核苷酸的设计和使用 |
| 3.8 显微注射 |
| 3.9 逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) |
| 3.9.1 Total RNA的提取 |
| 3.9.2 RNA反转录为cDNA |
| 3.9.3 RT-PCR |
| 3.10 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) |
| 3.11 斑马鱼胚胎观察 |
| 3.11.1 斑马鱼胚胎大体发育观察 |
| 3.11.2 斑马鱼胚胎血管发育观察 |
| 3.12 数据统计分析 |
| 第四章 实验结果 |
| 4.1 Adamts18 mRNA在胚胎发育早期头部的表达 |
| 4.2 Adamts18 mRNA在胚胎发育早期颈部的表达 |
| 4.3 Adamts18 mRNA在胚胎发育早期躯干部的表达 |
| 4.4 Adamts18 mRNA在胚胎期特定器官中的表达 |
| 4.5 Adamts18 mRNA在特定时期血管系统中的表达 |
| 4.6 Adamts18 mRNA在胚胎发育早期表达位置 |
| 4.7 ADAMTS18 在小鼠血管新生中的作用 |
| 4.8 adamts18 基因knockdown斑马鱼胚胎模型 |
| 4.8.1 adamts18 knockdown斑马鱼模型构建 |
| 4.8.2 Adamts18 影响斑马鱼胚胎发育 |
| 4.8.3 Adamts18 影响斑马鱼血液循环 |
| 4.8.4 Adamts18 影响斑马鱼胚胎躯干血管形成 |
| 4.8.5 Adamts18 影响斑马鱼胚胎CVP形成 |
| 4.8.6 Adamts18 影响血管新生相关信号通路 |
| 第五章 讨论和结论 |
| 5.1 讨论 |
| 5.2 结论 |
| 5.3 展望 |
| 第六章 附表 |
| 6.1 附表1 qRT-PCR引物 |
| 6.2 附表2 qRT-PCR统计学分析数据 |
| 参考文献 |
| 学术期间科研成果 |
| 致谢 |
（7）BmFoxA调控家蚕丝腺发育的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 家蚕丝腺概述 |
| 1.1.1 丝腺的形态和功能 |
| 1.1.2 丝腺的生长发育 |
| 1.1.3 丝腺的核内有丝分裂研究 |
| 1.1.4 丝腺的凋亡 |
| 1.2 FOX转录因子的研究 |
| 1.2.1 FOX因子的分类及功能研究 |
| 1.2.2 转录因子BmFoxA的研究进展 |
| 1.3 CRISPR-Cas9 的介绍 |
| 1.3.1 CRISPR-Cas9 系统的工作原理 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9 的应用 |
| 第2章 引言 |
| 2.1 研究背景 |
| 2.2 研究目的及意义 |
| 2.3 研究内容 |
| 2.4 技术路线 |
| 第3章 转基因敲除个体的获得和检测 |
| 3.1 实验材料与试剂 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验主要仪器 |
| 3.1.3 实验主要试剂 |
| 3.1.4 实验主要试剂的配制 |
| 3.2 实验方法与步骤 |
| 3.2.1 敲除靶位点选择 |
| 3.2.2 敲除引物设计及gRNA载体构建 |
| 3.2.3 细胞水平敲除验证 |
| 3.2.4 个体水平显微注射 |
| 3.2.5 转基因阳性个体荧光筛选 |
| 3.2.6 杂交制种 |
| 3.2.7 转基因个体插入gRNA序列检测 |
| 3.2.8 个体敲除基因测序检测 |
| 3.2.9 敲除个体蛋白水平检测 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 靶点筛选 |
| 3.3.2 敲除载体构建 |
| 3.3.3 细胞水平敲除验证 |
| 3.3.4 敲除个体获得 |
| 3.3.5 个体水平敲除检测 |
| 3.3.6 敲除个体gRNA检测 |
| 3.4 讨论 |
| 第4章 后部丝腺特异性敲除BmFoxA对丝腺发育的影响 |
| 4.1 实验材料与试剂 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验试剂和仪器 |
| 4.1.3 实验主要溶液配制 |
| 4.2 实验方法与步骤 |
| 4.2.1 丝腺解剖观察 |
| 4.2.2 丝腺重量统计 |
| 4.2.3 丝腺DAPI染色 |
| 4.2.4 丝腺细胞鬼笔环肽染色 |
| 4.2.5 蚕茧经济性状调查 |
| 4.2.6 蚕茧丝素丝胶含量计算 |
| 4.2.7 丝腺DNA含量计算 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 丝腺解剖观察 |
| 4.3.2 敲除BmFoxA对丝腺重量的影响 |
| 4.3.3 敲除个体经济性状分析 |
| 4.3.4 蚕茧丝素丝胶含量统计 |
| 4.3.5 后部丝腺DNA含量分析 |
| 4.3.6 丝腺DAPI染色 |
| 4.3.7 丝腺细胞鬼笔环肽染色 |
| 4.4 讨论 |
| 第5章 BmFoxA在中部丝腺特异性敲除和过表达对丝腺的影响 |
| 5.1 实验材料与试剂 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 实验试剂和仪器 |
| 5.2 实验方法与步骤 |
| 5.2.1 中部丝腺特异性敲除BmFoxA转基因家蚕个体杂交 |
| 5.2.2 BmFoxA-MSG-M转基因家蚕蛋白水平敲除检测 |
| 5.2.3 BmFoxA-MSG-M转基因家蚕丝腺表型观察 |
| 5.2.4 中部丝腺细胞鬼笔环肽染色 |
| 5.2.5 引物设计 |
| 5.2.6 中部丝腺个体水平过表达载体构建 |
| 5.2.7 后部丝腺个体水平过表达载体 |
| 5.2.8 显微注射 |
| 5.2.9 荧光筛选 |
| 5.2.10 荧光定量PCR检测 |
| 5.2.11 表型观察 |
| 5.3 实验结果与分析 |
| 5.3.1 中部丝腺特异性敲除个体筛选 |
| 5.3.2 敲除个体蛋白水平检测 |
| 5.3.3 敲除个体丝腺表型观察 |
| 5.3.4 丝腺细胞观察 |
| 5.3.5 BmFoxA-MSG-M转基因家蚕结茧情况 |
| 5.3.6 中部丝腺过表达载体构建 |
| 5.3.7 后部丝腺过表达载体构建 |
| 5.3.8 中部丝腺过表达阳性个体获得 |
| 5.3.9 中部丝腺过表达阳性个体丝腺表型观察 |
| 5.3.10 后部丝腺过表达个体筛选 |
| 5.4 讨论 |
| 第6章 BmFoxA调控家蚕丝腺发育机制初探 |
| 6.1 实验材料与试剂 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.2 实验试剂和仪器 |
| 6.1.3 定量引物序列 |
| 6.2 实验方法与步骤 |
| 6.2.1 BmN细胞的培养 |
| 6.2.2 细胞转染 |
| 6.2.3 细胞周期检测 |
| 6.2.4 细胞凋亡检测 |
| 6.2.5 荧光定量PCR检测差异表达基因 |
| 6.2.6 转录组测序 |
| 6.2.7 荧光定量PCR验证转录组数据 |
| 6.3 实验结果与分析 |
| 6.3.1 过表达BmFoxA细胞周期阻滞在G1/S期 |
| 6.3.2 荧光定量检测过表达BmFoxA后细胞周期因子表达 |
| 6.3.3 过表达BmFoxA后细胞凋亡水平检测 |
| 6.3.4 BmFoxA-PSG-M转基因家蚕凋亡因子检测 |
| 6.3.5 RNA-seq结果验证 |
| 6.3.6 野生型家蚕与BmFoxA-PSG-M转基因家蚕后部丝腺差异基因分析 |
| 6.3.7 GO功能显着性富集分析 |
| 6.3.8 KEGG pathway显着性差异分析 |
| 6.4 讨论 |
| 第7章 综合与讨论 |
| 7.1 BmFoxA-PSG-M转基因家蚕敲除结果分析 |
| 7.2 BmFoxA-PSG-M转基因家蚕丝腺表型分析 |
| 7.3 BmFoxA-PSG-M转基因家蚕经济性状统计 |
| 7.4 BmFoxA-MSG-M转基因家蚕丝腺表型观察 |
| 7.5 中部丝腺过表达BmFoxA转基因阳性个体丝腺表型观察 |
| 7.6 BmFoxA调控丝腺发育分子机制初探 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文及参研课题 |
| 发表文章 |
| 致谢 |
（8）转录因子Lhx9和Lhx4在斑马鱼胚胎发生中的表达模式及其在视网膜发育中的功能研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 斑马鱼的研究进展 |
| 1.2 斑马鱼视网膜的研究进展 |
| 1.3 LIM-HD转录因子在视网膜发育中的研究进展 |
| 1.4 研究目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验仪器 |
| 2.3 主要试剂及配制 |
| 2.4 配鱼和收集鱼卵 |
| 2.5 核酸提取和荧光定量PCR |
| 2.6 制备核酸探针 |
| 2.7 整胚原位杂交 |
| 2.8 切片原位杂交 |
| 2.9 斑马鱼胚胎的显微注射 |
| 2.10 斑马鱼形态学观察 |
| 2.11 免疫荧光染色 |
| 2.12 光刺激反应行为学 |
| 2.13 统计分析 |
| 第三章 lhx9和lhx4 在斑马鱼胚胎发生中的表达模式 |
| 3.1 lhx9 在斑马鱼胚胎发生中的表达模式 |
| 3.2 lhx9 在斑马鱼视网膜发生中的表达模式 |
| 3.3 lhx4 在斑马鱼胚胎发生中的表达模式 |
| 3.4 lhx4 在斑马鱼视网膜发生中的表达模式 |
| 第四章 Lhx9 在斑马鱼视网膜发育中的功能研究 |
| 4.1 MO敲减lhx9 斑马鱼模型的构建 |
| 4.2 MO敲减lhx9 对斑马鱼胚胎形态发育的影响 |
| 4.3 MO敲减lhx9 对斑马鱼视网膜发育的影响 |
| 4.4 MO敲减lhx9 对斑马鱼视网膜细胞凋亡和增殖的影响 |
| 4.5 MO敲减lhx9 对斑马鱼光刺激反应的影响 |
| 第五章 Lhx4 在斑马鱼视网膜发育中的功能研究 |
| 5.1 MO敲减lhx4 斑马鱼模型的构建 |
| 5.2 MO敲减lhx4 对斑马鱼胚胎形态发育的影响 |
| 5.3 MO敲减lhx4 对斑马鱼视网膜发育的影响 |
| 5.4 MO敲减lhx4 对斑马鱼视网膜细胞凋亡的影响 |
| 5.5 MO敲减lhx4 对斑马鱼光刺激反应的影响 |
| 5.6 vivo-MO敲减视网膜内lhx4 斑马鱼模型的构建 |
| 5.7 vivo-MO敲减视网膜内lhx4 对胚胎形态发育的影响 |
| 5.8 vivo-MO敲减视网膜内lhx4 对视网膜发育的影响 |
| 5.9 vivo-MO敲减视网膜内lhx4 对视网膜内细胞凋亡的影响 |
| 5.10 vivo-MO敲减视网膜内lhx4 对斑马鱼光刺激反应的影响 |
| 第六章 讨论与结论 |
| 6.1 讨论与展望 |
| 6.2 结论 |
| 第七章 本论文的创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 作者简历 |
（9）美人城手记（论文提纲范文）
| 第一章 |
| 1.陈星光：我有点兴味索然 |
| 2.关立夏：他们复活了鲁迅 |
| 3.陈星光：有一些悲伤是无形的 |
| 4.关立夏：缝隙里突然长出花来 |
| 第二章 |
| 1.关立夏：像一条受伤的鱼 |
| 2.陈星光：真实与虚幻的分界点 |
| 3.关立夏：我想抱着她哭一会儿 |
| 4.陈星光：那就是上帝洗牌了 |
| 5.关立夏：脚下的路在重复和延伸 |
| 第三章 |
| 1.钟小界：头也不回地走掉了 |
| 2.陈星光：第101号游戏档案 |
| 3.关立夏：第101号游戏档案 |
| 4.钟小界：美人城是唯一的主角 |
| 5.陈星光：第2364号游戏档案 |
| 6.关立夏：第2364号游戏档案 |
| 7.钟小界：穷人如何自救 |
| 第四章 |
| 1.陈星空：我不是一个孩子 |
| 2.陈达瓦：我不是个好孩子 |
| 3.钟小界：真正的灾难是丢了钥匙 |
| 4.陈星空：确保记忆不要走形 |
| 5.钟小界：这是历史的倒退 |
| 6.陈达瓦：外面就要战争了 |
| 7.陈星光：第33021号游戏档案 |
| 8.关立夏：第33021号游戏档案 |
| 9.陈星空：人类文明的布道者 |
| 第五章 |
| 1.钟小界：美人城会变成臭虫城 |
| 2.关立秋：不用再为结巴而羞愧 |
| 3.陈星光：第6303695号游戏档案 |
| 4.关立夏：第6303695号游戏档案 |
| 5.陈达瓦：我们无法战胜厌倦 |
| 6.关立秋：我从来都很快 |
| 7.陈星空：像种子一样在某处发芽 |
（10）完美人类(下)（论文提纲范文）
| 1 1 了外面的泛光灯和喷淋装置。在明亮的灯光下, 喷头扫过草坪之后, 又将他周围的灌木丛浇了个透。他一动不动。罪人中的那个男的出现在窗前, 他朝外面看了看, 然后走开了。他什么也没有做。三分钟过后, 灯灭了。 |
| 1 1 点45分, 他回到凯伯恩村, 将车开进了校舍后面的停车场。 |
| 1 2 点22分。 |
四、人在胚胎期只有一只眼睛（论文参考文献）
- [1]大娄山[J]. 王华. 民族文学, 2021(07)
- [2]基于术语的知识图谱构建对译者的影响探究[D]. 张轶群. 曲阜师范大学, 2021(02)
- [3]小鼠胚胎生血内皮细胞时空与功能异质性研究[D]. 李昀桥. 军事科学院, 2021(02)
- [4]拟穴青蟹早期发育转录组分析及Hox基因SpUbx/SpAntp/SpAbd-A功能初步研究[D]. 张银. 汕头大学, 2020(01)
- [5]组蛋白甲基转移酶SETD2在小鼠大脑皮层发育和自闭症样行为中的作用及机制研究[D]. 徐立超. 武汉大学, 2020(02)
- [6]金属蛋白酶ADAMTS18在小鼠胚胎发育早期的表达谱系及其在血管新生中的作用研究[D]. 张天豪. 华东师范大学, 2020(08)
- [7]BmFoxA调控家蚕丝腺发育的研究[D]. 刘力瑛. 西南大学, 2020(01)
- [8]转录因子Lhx9和Lhx4在斑马鱼胚胎发生中的表达模式及其在视网膜发育中的功能研究[D]. 郭瑞. 浙江大学, 2020(08)
- [9]美人城手记[J]. 陈崇正. 江南, 2020(02)
- [10]完美人类(下)[J]. 彼得·詹姆斯,王好强,黄力平. 译林, 2018(04)