问：高效液相色谱分离法实验报告
- 答：目的:达到分离分析的目的。
原理:通过HPLC分清升离测定来对目标化合物的分析鉴定。
试剂:相关流动相,固定相等。
仪器:HPLC等。
实验步骤:装样,检物桐测,分析。
结论:测定出结果。
分析:对图谱罩正坦进行分析。
问：高效液相色谱仪的使用和原理分析
- 答：实验内容和原理：
储备器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）中；由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分配成单个祖坟依次从柱内流出，经过哦检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
在适宜的条件下，高效液相色谱可分离溶液中不同的组分，样品进高效液相色谱仪，经反相C\18液相色谱分离后，以色谱峰的保留时间定性，利用色谱峰面积在一定范围内与浓度成线性关系进行定晌州缺量。本实验采用内标法，用β-胡萝卜素标准品分析未知浓度的类胡萝卜素产物的相关含量。
实验步骤：
1、样品和标准品溶解和过滤：用丙酮作溶剂，溶解β-胡萝卜素标准品和类胡萝卜素样品。用滤膜（0.45um）过滤，备用。
2、开机，依次通过各分离单元、检测器、计算机电源。
3、流动相脱气，确认所有溶剂管路都充满宴辩溶剂。
4、启动溶剂管理系统，冲洗自动进样器和进样针，装入样品和转盘，编辑分析方法及执行样品分析表。
5、样品测定：色谱条件，色谱柱（C18，4.6mm*250mm，5um）；流动相，甲酸；乙腈；异丙醇=5：4：1（v/v）；流速 1ml/min；检测波长，480nm。
单位内标法定量：取混合使用液20ul注入高效液相色谱仪进行分离。记录各个峰的峰面积。按下式计算相对含量。
q样品=（q标准品*A样品）/A标准品
6、关机，使用完毕后，按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫，关闭电源迹裤开关。数据采集完毕后，关闭紫外检测器电源开关。处理数据后，关闭计算机电源开关，并做使用登记。 - 答：自20世纪70年代以来，中国已有多个研究部门和工厂开发和生产高液相色谱仪。 LC已进入中国许多科学领域的实用阶段，特别是对热稳定性差或蒸气压低的样品组分进行分析，显示出LC的优越性。
近年来，高液相色谱仪在油脂分析方面取春族得了突破，特别是在石油中测定多环芳烃、重烃中。以己烷、二氯甲烷为流动相，苟爱仙采用多维高效液相色谱技术和适当的梯度洗脱条件，实现了残留烃基的良好分离和检测。吕振波等还使用HPLC分离和分析润滑基础油的化学组成。使用氰基柱和二氧化硅柱双柱的组合。正己烷用作流动相，折射率检测器用于检测不同的来源。和蒸馏范围内的基础油烃的家族组成。
高效液相色谱仪用途
过去，高效液相色谱仪在石油化学工业中，农药、环保，薄层色谱（TLC）和气相色谱（OC）常用于含量测定，而液相色谱（LC）仅用于测定标准样品。并研究分离的可能性。
高效液相色谱在橡森梁生命科学研究工作中，最大的问题是基因的解密。从基因组DNA序列，基因的表达时间无法回答、表达量、蛋白质、的翻译后加工和修饰及其亚细胞分布。这些问题在基因组中无法解决，预计会在Proteome研究中找到答案。在研究的细胞中有30,000到50,000种具有不同功能的蛋白质。目前，蛋白质组学研究中使用的双向电泳方法只能区分2000~3000个蛋白质点。可以通过使用具有尺寸排阻色谱的梁运二维HPLC高效液相色谱进行预分离来尝试现代蛋白质组分析。高效液相色谱和双向电泳将成为蛋白质组学的重要分离工具。因此，高效液相色谱将为揭示生命的奥秘做出更大的贡献。本内容来源：冉盛网百度贴吧贴子：分析各大品牌高效液相色谱仪哪家好？ - 答：高效液相色谱仪的使用和原理分析对于新手来说有很大的帮助
高效相色谱法是一种雀缺分离技术，试样混合物的分离过程也就是试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不燃态断进行着的分配过程。
其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流顷段辩体（气体或液体），称为流动相。
问：高效液相色谱的优点
- 答：高效液相色谱的优点如下：
1、高效液相色谱仪分析速度快，重复性好。
2、高效液相色谱仪分辨率高，灵敏度高。
3、高效液相色谱仪定量精度高。
4、高效液相色谱仪应用范围广，适合分析高沸点、大分子、强极性和热稳定性差的化合物。核枯
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography\HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统。
将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有老核固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、侍氏掘农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
